[发明专利]一种用于检测欧洲鳗鲡圆环病毒的荧光定量PCR引物组及试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测欧洲鳗鲡圆环病毒的荧光定量PCR引物组，其特征在于：

所述引物组由正向引物F、反向引物R和荧光探针Q组成，所述正向引物F的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，反向引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，荧光探针Q的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。

2.根据权利要求1所述的一种用于检测欧洲鳗鲡圆环病毒的荧光定量PCR引物组，其特征在于：

所述荧光探针Q的5’端标记荧光基团，3’端标记淬灭基团。

3.一种用于检测欧洲鳗鲡圆环病毒的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：

包含权利要求1所述的引物组。

4.根据权利要求3所述的一种用于检测欧洲鳗鲡圆环病毒的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：

还包括DNA聚合酶，UDG酶，2×反应缓冲液，密封液，阳性对照品，阴性对照品。

5.根据权利要求3所述的一种用于检测欧洲鳗鲡圆环病毒的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：

所述2×反应缓冲液是含有dATP、dCTP、dGTP、dUTP的反应液。

6.根据权利要求3所述的一种用于检测欧洲鳗鲡圆环病毒的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：

所述DNA聚合酶为Taq酶，UDG酶为热敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶，密封液为矿物油。

7.根据权利要求3所述的一种用于检测欧洲鳗鲡圆环病毒的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：

所述阳性对照品为含有欧洲鳗鲡圆环病毒检测靶标基因的质粒DNA，质粒DNA浓度为10⁶copies/μL，所述阴性对照为灭菌超纯水。

8.根据权利要求3所述的一种用于检测欧洲鳗鲡圆环病毒的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：

其反应体系成分组成为：终浓度为0.2～0.6μM的正向引物F，终浓度为0.2～0.6μM的反向引物R，终浓度为0.1～0.3μM的荧光探针Q引物，2×反应缓冲液12.5μL，DNA聚合酶2～5U，UDG酶0.3～0.7U，待检样品5μL，加灭菌超纯水至25μL。

9.根据权利要求8所述一种用于检测欧洲鳗鲡圆环病毒的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：

其反应体系成分组成为：终浓度为0.4μM的正向引物F，终浓度为0.4μM的反向引物R，终浓度为0.2μM的荧光探针Q引物，2×反应缓冲液12.5μL，DNA聚合酶4U，UDG酶0.5U，待检样品5μL，加灭菌超纯水至25μL。

10.根据权利要求3-9任一所述一种用于检测欧洲鳗鲡圆环病毒的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：

其反应体系的反应条件为50℃5min；95℃5min；95℃15s、60℃30s 45个循环。