[发明专利]一种细菌协同磁性硅藻土修复砷和抗生素污染土壤的方法

权利要求书

1.一种细菌协同磁性硅藻土修复砷和抗生素污染土壤的方法，其特征在于：包括如下步骤：细菌菌株分离→菌种富集培养→制备磁性硅藻土材料→土壤修复。

2.根据权利要求1所述的一种细菌协同磁性硅藻土修复砷和抗生素污染土壤的方法，其特征在于：细菌菌株的分离培养具体包括如下步骤：

S11驯化：首先把带有混合微生物群的水样加入到营养肉汤培养基中，培养60-72h后将营养肉汤培养基中的菌液转接到PYCM培养基中继续驯化；

S12逐级稀释：吸取PYCM中的菌液按10^-1，10^-2，10^-3，10^-4，10^-5，10^-6，10^-7，10^-8的梯度进行稀释；

S13涂布：先倒好平板让其凝固，再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布器在表面均匀涂布，使菌液均匀分布，以便长出均匀的单个菌落；

S14板划线：配制PYCM固体平板，用接种环挑取单个菌落划线到固体平板上，反复多次划线，得到纯种菌落，通过谱系鉴定命名为敏捷食酸菌WHW-1。

3.根据权利要求1所述的细菌协同磁性硅藻土修复砷和抗生素污染土壤的方法，其特征在于：细菌菌种富集培养具体包括如下步骤：

S21：将得到的敏捷食酸菌WHW-1加入至营养肉汤培养基中培养得到菌液，转接到PYCM培养基中；

S22：调节pH为6.0-8.0，灭菌后加入菌液，将培养基置于水平振荡器培养36-48小时。

4.根据权利要求2或3所述的细菌协同磁性硅藻土修复砷和抗生素污染土壤的方法，其特征在于：步骤S5和步骤S6中PYCM培养基制备方法具体为：0.8g/L蛋白胨、0.2g/L酵母浸粉、0.1g/L磷酸氢二钾、0.2g/L硫酸镁、0.2g/L硝酸钠、0.1g/L氯化钙、0.1g/L氯化铵、1g/L柠檬酸铁铵、0.2g/L硫酸锰、0.1g/L碳酸铵，调节pH＝7±0.2。

5.根据权利要求3所述的细菌协同磁性硅藻土修复砷和抗生素污染土壤的方法，其特征在于：步骤S2中菌液的接种量按体积比为2-10％。

6.根据权利要求3所述的细菌协同磁性硅藻土修复砷和抗生素污染土壤的方法，其特征在于：水平振荡器的振动频率为120-150rpm，温度为20-30℃。

7.根据权利要求1所述的细菌协同磁性硅藻土修复砷和抗生素污染土壤的方法，其特征在于：制备磁性硅藻土材料具体包括如下步骤：

S31：将30g硅藻土原土与300mL浓度为5％的盐酸溶液混合并煮沸1h后抽滤，用蒸馏水洗涤至中性，置于105℃真空干燥箱中烘干，再置于马弗炉中调节温度至500℃焙烧90min，冷却、研磨和过筛备用；

S32：按摩尔比2:1的比例称取固体FeCl₃·6H₂O和固体FeSO₄·7H₂O，再按质量总和与硅藻土比例2:1称取步骤S31中的硅藻土；

S33：将称取好的FeCl₃·6H₂O、FeSO₄·7H₂O装入500mL烧杯中，加入300mL蒸馏水搅拌溶解；

S34：将称取的硅藻土加入溶解后的溶液中，将烧杯置于磁力搅拌器上,温度设置为90℃,搅拌20min后,再往烧杯中加入体积比为20-30％的氨水，搅拌1h后，关闭搅拌；

S35：将温度调至100℃，静置2h后，取出烧杯，将烧杯内混合物加入蒸馏水用抽滤机抽滤洗涤，直至中性；

S36：放入恒温干燥箱中干燥2h，温度设置为105℃，冷却、研磨和过筛网后即为磁性硅藻土产物进行研磨后，收集备用。

8.根据权利要求7所述的细菌协同磁性硅藻土修复砷和抗生素污染土壤的方法，其特征在于：步骤S31和S36中筛网的目数均为80-100目。

9.根据权利要求1所述的细菌协同磁性硅藻土修复砷和抗生素污染土壤的方法，其特征在于：土壤修复具体包括如下步骤：

S41：将步骤S5中得到的细菌悬浊液分装到离心管中，在6000r/min下高速离心10min，弃去上清液；

S42：将其悬浮于水中，以液固比30-50％添加到复合污染土壤中，同时按投加比1-3％的比例加入磁性硅藻土材料搅拌混匀，搅拌5-30分钟；

S43：置于15-35℃的室温条件下，培养2-4周，让细菌诱导产生生物锰氧化物，这些生物锰氧化物氧化、吸附、固定三价砷为五价砷，同时氧化分解抗生素为二氧化碳和水，实现砷和抗生素污染土壤的修复。