[发明专利]CEY17_RS11900基因突变体及其在制备L-缬氨酸中的应用

权利要求书

1.蛋白质，其特征在于，所述蛋白质为下述任一种：

A1)氨基酸序列是SEQ ID No.4的蛋白质；

A2)将SEQ ID No.4所示的氨基酸序列经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有相同功能的蛋白质；

A3)在A1)或A2)的N端和/或C端连接标签得到的具有相同功能的融合蛋白质。

2.编码权利要求1所述任一蛋白质的核酸分子。

3.根据权利要求2所述的任一核酸分子，其特征在于，所述核酸分子为编码序列是SEQID No.3所示的DNA分子或核苷酸序列是SEQ ID No.3所示的DNA分子。

4.生物材料，其特征在于，所述生物材料为下述任一种：

C1)含有权利要求2或3所述任一核酸分子的表达盒；

C2)含有权利要求2或3所述任一核酸分子的重组载体、或含有C1)所述任一表达盒的重组载体；

C3)含有权利要求2或3所述任一核酸分子的重组微生物、或含有C1)所述任一表达盒的重组微生物、或含有C2)所述任一重组载体的重组微生物。

5.D1)-D8)中任一项在构建产L-缬氨酸的基因工程菌中的应用，和/或，在制备L-缬氨酸中的应用，和/或，在调控微生物L-缬氨酸的产量中的应用，其中所述D1)-D8)为：

D1)权利要求1所述的任一蛋白质；

D2)权利要求2或3所述的任一核酸分子；

D3)权利要求4所述的任一生物材料；

D4)核苷酸序列为SEQ ID No.1的DNA分子；

D5)SEQ ID No.1所示的核苷酸序列经过修饰和/或一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加得到的与SEQ ID No.1所示的DNA分子具有90％以上的同一性，且具有相同功能的DNA分子；

D6)含有D4)或D5)中所述DNA分子的表达盒；

D7)含有D4)或D5)中所述DNA分子的重组载体、或含有D6)所述表达盒的重组载体；

D8)含有D4)或D5)中所述DNA分子的重组微生物、或含有D6)所述表达盒的重组微生物、或含有D7)所述重组载体的重组微生物。

6.一种提高微生物L-缬氨酸的产量的方法，其特征在于，所述方法包括下述任一种：

E1)提高目的微生物中的权利要求2或3所述任一核酸分子的表达量或含量，得到L-缬氨酸的产量高于所述目的微生物的微生物；

E2)提高目的微生物中的权利要求5中D4)或D5)所述DNA分子的表达量或含量，得到L-缬氨酸的产量高于所述目的微生物的微生物；

E3)对所述目的微生物中的核苷酸序列为SEQ ID No.1的DNA分子进行突变，得到L-缬氨酸的产量高于所述目的微生物的微生物。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述突变为将SEQ ID No.1所示DNA分子编码的氨基酸序列的第87位的丙氨酸残基突变为缬氨酸残基，和第109位的甘氨酸残基突变为缬氨酸残基。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述突变是通过定点突变方法将SEQ IDNo.1所示DNA分子中第260位的核苷酸C突变为T，和第326-327位的核苷酸GC突变为TA。

9.一种制备L-缬氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括利用权利要求4或5中所述的任一重组微生物生产L-缬氨酸。

10.一种构建权利要求4或5中所述重组微生物的方法，其特征在于，所述方法包括至少下述任一种：

F1)将权利要求2或3所述的任一核酸分子导入目的微生物，得到所述重组微生物；

F2)将SEQ ID No.1所示的DNA分子导入目的微生物，得到所述重组微生物；

F3)利用基因编辑手段对SEQ ID No.1所示的DNA分子进行编辑，使目的微生物中含有SEQ ID No.3所示的DNA分子。