[发明专利]一种诱导禾谷镰刀菌大量产孢及制备孢子液方法

说明书

本发明属于植物保护领域，涉及一种诱导禾谷镰刀菌大量产孢及制备孢子液方法，包括：将禾谷镰刀菌活化，得到菌饼；将活化后的菌饼接种到麦麸培养基，进行培养；对产孢后培养基进行过滤，取滤液进行固液分离，去掉上清液，用无菌水对孢子进行稀释，得到孢子悬液。本发明利用麦麸培养基可以促进禾谷镰刀菌大量产孢，培养3‑5天，菌丝体呈红色(赤霉病小麦粒颜色)，过滤菌丝即可得到大量的禾谷镰刀菌孢子液，血球计数板计数后，利用无菌水调整孢子液浓度，即可得到合适浓度的禾谷镰刀菌孢子液。原料易得，成本低廉，操作简单。可以获得大量的形态均一的孢子。

技术领域

本发明属于植物保护技术领域，具体为麦麸在诱导禾谷镰刀菌产生分生孢上的应用及制备一定浓度的孢子液方法。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

禾谷镰刀菌是一种农业中重要的病原菌，侵染小麦、玉米、水稻等，引起植物病害，造成粮食减产甚至绝产，是世界性农业难题。

禾谷镰刀菌侵染作物后产脱氧雪腐镰刀烯醇(呕吐毒素，简称DON)，引起人畜中毒。

禾谷镰刀菌在许多培养基上，只进行营养生长，不产分生孢子。不利于禾谷镰刀菌的鉴定，及发生规律的研究。在研究禾谷镰刀菌防治技术时，需要首先制备禾谷镰刀菌孢子菌悬液注射到作物中，因此需要大量的孢子液。

目前，现有的机种绿豆培养基、康乃馨培养基产孢子量较少，周期长，容易发生变异。

发明内容

针对上述所存在的问题，本发明提出了一种诱导禾谷镰刀菌大量产孢及制备孢子液方法。

为实现上述技术目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一个方面，提供了一种诱导禾谷镰刀菌大量产孢及制备孢子液方法，包括：

将禾谷镰刀菌活化，得到菌饼；

将活化后的菌饼接种到麦麸培养基，进行培养；

对产孢后培养基进行过滤，取滤液进行固液分离，去掉上清液，用无菌水对孢子进行稀释，得到孢子悬液；

其中，所述麦麸培养基的制备方法为：麦麸过筛子，去掉面粉和次粉；加水，大火煮10-15min；过滤除去滤渣；将滤液定容，灭菌，冷却后加入双抗，即得。

麦麸是面粉生产过程中的副产物，原料来源简单易得，成本低廉。研究发现：小麦本身是禾谷镰刀菌的寄主，利用麦麸等天然培养基诱导禾谷镰刀菌产孢，有利于保持禾谷镰刀菌的性状和生理活性特征，避免在传代过程中产毒活性减弱，减少变异情况。

本发明的第二个方面，提供了任一上述的方法制备的孢子液。

本发明的第三个方面，提供了上述的孢子液在植物病害防治中的应用。

本发明的有益效果在于：

(1)本发明利用麦麸培养基可以促进禾谷镰刀菌大量产孢，培养3-5天，菌丝体呈红色(赤霉病小麦粒颜色)，过滤菌丝即可得到大量的禾谷镰刀菌孢子液，血球计数板计数后，利用无菌水调整孢子液浓度，即可得到合适浓度的禾谷镰刀菌孢子液。原料易得，成本低廉，操作简单。可以获得大量的形态均一的孢子。

(2)本申请的操作方法简单、成本低、具有普适性，易于规模化生产。

附图说明

构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。

图1.显微镜400×放大图(产孢结构，分生孢子座和分生孢子梗)；