[发明专利]一种靶向清除特异性B淋巴细胞的融合蛋白及其应用

说明书

本发明公开了一种能够靶向清除特异性B淋巴细胞的融合蛋白及其应用，涉及生物技术领域。该融合蛋白包括B淋巴细胞结合结构域，以及与B淋巴细胞结合结构域连接的抗体Fc端，B淋巴细胞结合结构域具有与特异性B淋巴细胞结合的特性。该融合蛋白可以与被自身抗原激活的特异性B淋巴细胞结合，通过Fc端激活免疫细胞及分子，从而靶向清除特异性B淋巴细胞；该融合蛋白可应用于制备相应的药物及试剂盒，用于自身免疫疾病诊疗领域。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种融合蛋白及其应用。

背景技术

自身免疫性疾病是一种由自身抗原激活B淋巴细胞，产生自身抗体而导致对自身组织免疫攻击而产生的疾病，B淋巴细胞在自身免疫性疾病的发生发展过程中发挥重要作用。自身免疫性疾病的主要发病基础之一是产生自身抗体的自身反应性B淋巴细胞，因而B淋巴细胞清除疗法是一种重要的治疗方法。

人类B细胞主要在骨髓中发育，成熟后进入外周血，在其个体发育过程中，依次明确的表面抗原和DNA重排情况可分为：祖B细胞、前B细胞、未成熟B细胞、过渡B细胞、初始B细胞、记忆细胞、原浆细胞和浆细胞等。靶标一般为B细胞表面抗原，包括CD19（B细胞全生命周期表达）、CD20（Pro-B和浆细胞不表达）、CD38（浆母细胞，浆细胞表达）和CD138（浆细胞表达）等。目前B淋巴细胞清除策略是利用抗体药物靶向结合B细胞亚群的特定抗原，通过抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用或补体依赖的细胞毒性作用介导B淋巴细胞裂解，从而清除B淋巴细胞，或者通过靶向B淋巴细胞存活需要的细胞因子，诱导B细胞凋亡，达到清除B淋巴细胞亚群的目的。

然而，目前上述方法清除的是特定B淋巴细胞亚群，这些B淋巴细胞亚群在调节免疫，在抗感染及抗肿瘤等方面发挥重要作用。因此，上述清除特定B淋巴细胞亚群的治疗药物存在着加剧免疫紊乱、导致感染及肿瘤发生风险等副作用。可见，如果能够特异性清除被自身抗原激活而产生自身特异性抗体的B淋巴细胞，而对其他B淋巴细胞亚群不产生影响，将极大提高自身免疫病的疗效和安全性。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种人工改造的该融合蛋白，可以与被特异性抗原激活的特异性B淋巴细胞结合，对特异性B淋巴细胞进行靶向清除。

本发明的另一目的在于提供一种细胞。

本发明的另一目的在于提供一种组合物。

本发明的另一目的在于提供上述细胞的应用。

本发明是这样实现的：

一种融合蛋白，其特征在于，其包括B淋巴细胞结合结构域、以及与B淋巴细胞结合结构域连接的抗体Fc端，B细胞结合结构域具有与被特异性抗原激活的特异性B淋巴细胞结合的特性。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述特异性B淋巴细胞，是指能够被任意一种特异性抗原激活产生相应的特异性抗体的B淋巴细胞。

但需要说明的是，本发明的B细胞包括浆细胞和记忆B细胞。针对所述特异性B淋巴细胞应用到本发明中均属于本发明的保护范围。

当然，需要说明的是，特异性抗原，可以是任意能够诱导产生特异性抗体的所有动物来源的抗原。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，TSHr片段包含SEQ ID NO.1序列中如表1所列的一个及多个氨基酸序列；TPO多肽片段包含SEQ ID NO.2序列中如表2所列的一个及多个氨基酸序列；TG多肽片段包含SEQ ID NO.3序列中如表3所列的一个及多个氨基酸序列。

含有表1的肽段可以靶向分泌TSHr抗体的特异性B淋巴细胞及记忆B淋巴细胞；含有表2的肽段可以靶向分泌TPO抗体的特异性B淋巴细胞及记忆B淋巴细胞；含有表3的肽段可以靶向分泌TG抗体的特异性B淋巴细胞及记忆B淋巴细胞。用于靶向清除产生甲状腺自身抗体的特异性B细胞，治疗自身免疫性甲状腺疾病。