[发明专利]一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物

权利要求书

1.一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物，其特征在于，合成以ACE2中和冠状病毒和靶向递送抗变异靶标shRNA的ACE2siRNA，包括分别合成以冠状病毒保守基因为靶标的shRNA和以冠状病毒受体结合域RBD为配体的ACE2，然后将合成的ACE2分别连接到合成的shRNA的正反义链上，构成由ACE2和shRNA组成的ACE2siRNA，包括进一步的脂质体修饰，使被ACE2靶向递送的shRNA特异性间接结合RBD，形成shRNA-ACE2-RBD-病毒的复合物，进而使shRNA被复合物靶向递送而随着病毒的感染进入靶细胞，起抗变异靶标的RNA干扰作用。

2.根据权利要求1所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物，其特征在于，所述以保守基因为靶标是指用于合成shRNA的siRNA选自数据库记载的各种致病性冠状病毒及其变异毒株的共有基因，使合成的shRNA靶向干扰所述共有基因，从而起广谱抗变异毒株的作用；所述共有基因包括但不限于超保守基因、保守基因和/或由保守微卫星拼接的基因。

3.根据权利要求1、2所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物，其特征在于，所述合成shRNA包括但不限于首先合成2条互补的约21-25nt的siRNA寡核苷酸多肽以及合成起间隔作用的loop环碱基序列，然后将所合成的siRNA和loop环连接成由loop环间隔成的小发夹shRNA双链，继之在shRNA双链的每条单链上各连接ACE2多肽。

4.根据权利要求1、2所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物，其特征在于，所述以保守基因为靶标是指靶向所述保守基因的siRNA序列包括但不限于SEQ ID NO.1～41；所述以超保守基因、保守基因或保守微卫星为靶标的siRNA序列包括但不限于SEQ IDNO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5；所述保守基因包括但不限于WUHAN株、DELTA变异株和/或OMICRON变异株共有的基因序列，其siRNA序列包括但不限于SEQ ID NO.9～11、SEQ IDNO.16～20、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.26～27、SEQ ID NO.31～33、SEQ ID NO.35或SEQ IDNO.37～39。

5.根据权利要求1、3所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物，其特征在于，所述ACE2siRNA包括将所述ACE2与所述shRNA和/或siRNA连接成化合物，或将所述shRNA和/或siRNA插入到所述ACE2多肽中间，连接成化合物，包括进而以脂质体修饰化合物。

6.根据权利要求1、5所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物，其特征在于，所述ACE2包括全长ACE2、胞外ACE2、跨膜ACE2、胞内ACE2或密码子优化的ACE2多肽。

7.根据权利要求1、6所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物，其特征在于，所述ACE2包括但不限于第1-740位氨基酸的胞外ACE2、第741-763位氨基酸的跨膜ACE2、第764-805位氨基酸的胞内ACE2以及经氨基酸序列优化的ACE2多肽。

8.根据权利要求1、5所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物，其特征在于，所述连接或合成包括但不限于将ACE2与shRNA的反义链3'末端、正义链5'末端或3'末端进行连接，并包括但不限于以带间隔臂的羧腙键、二硫键、磷酸二酯键、二硫代磷酸脂键、硫醚键、肟键、酰胺键、马来酰亚胺-巯基键的化学偶联或共价偶联进行连接。

9.根据权利要求1所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物，其特征在于，所述ACE2siRNA包括在shRNA的正反义链上分别连接ACE2或RBD，或分别连接其多肽。

10.根据权利要求1、5所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物，其特征在于，所述脂质体修饰ACE2siRNA包括但不限于制备ACE2-shRNA/ch1-ACE2、siRNA/ch1和shRNA/ch1、ACE2-siRNA/ch1、ACE2-shRNA/ch1、3ACE2-shRNA/ch1、2ACE2-shRNA/siRNA/ch1、2ACE2-2shRNA/ch1、4ACE2-2shRNA/ch1和ACE2-siRNA/lip。