[发明专利]一种肽探针及其应用和包含该肽探针的试剂盒

说明书

本发明涉及肽探针技术领域，具体涉及一种肽探针及其应用和包含该肽探针的试剂盒。肽探针为Y形结构，Y形结构的一条分支为Suc‑Val‑Pro‑Phesupgt;P/supgt;‑(OPh)subgt;2/subgt;，另一支分支为Asp‑Ala‑His‑Lys‑孟加拉红，所述肽探针用于制备血清Cu(Ⅱ)及组织蛋白酶G的检测试剂盒。本发明提供的肽探针包含一条蛋白酶抑制剂分支和一条金属离子螯合剂分支，能够同时检测血液中组织蛋白酶G和Cu(Ⅱ)水平；该肽探针的化学结构非常简单，与抗体和酶相比，制造成本低廉，且与临床样本中各种生物分子的相互作用模式也相对清晰，不易受到样品中非特异性干扰蛋白的影响。

技术领域

本发明涉及肽探针技术领域，具体涉及一种肽探针及其应用和包含该肽探针的试剂盒。

背景技术

近年来，随着人们生活水平发展及其饮食结构改变，急性心肌梗死患病率逐年增加，已成为危害人类健康的首要疾病。再灌注治疗是急性ST段抬高心肌梗死最主要的治疗措施，再灌注损伤是其常见并发症，因其发病过程易于一般的损伤出血相混淆，最终延误治疗时间，因此，如何提高缺血再灌注损伤的诊断显得尤为关键。由于心肌在再灌注过程中会引发过度的氧化应激和炎症反应，细胞还原/氧化平衡被破坏，生成大量活性氧，释放组织蛋白酶G并通过中性粒细胞进入血液。组织蛋白酶与活性化学物质会发生协同作用诱导缺血/再灌注后的心肌重塑和功能障碍，因此有必要对这些酶与活性化学物质进行持续的检测，以提供预后信息。

然而，由于传统的蛋白质检测是基于抗体和酶的生物分析，这些生物大分子相对昂贵，因此对大多数患者而言，每天频繁进行检测是难以负担的。基于此，有必要提供一种成本更低的检测试剂。

发明内容

针对传统生物分析技术检测成本高的技术问题，本发明提供一种肽探针及其应用和包含该肽探针的试剂盒，该肽探针包含一条蛋白酶抑制剂分支Suc-Val-Pro-Phe^P-(OPh)₂和一条金属离子螯合剂分支Asp-Ala-His-Lys-孟加拉红，能够同时检测血液中组织蛋白酶G和Cu(Ⅱ)水平；该肽探针的化学结构非常简单，与抗体和酶相比，制造成本低廉，且与临床样本中各种生物分子的相互作用模式也相对清晰，不易受到样品中非特异性干扰蛋白的影响。

第一方面，本发明提供一种肽探针，所述肽探针为Y形结构，Y形结构的一条分支为Suc-Val-Pro-Phe^P-(OPh)₂，另一支分支为Asp-Ala-His-Lys-孟加拉红。

进一步的，所述肽探针的结构式如下：

第二方面，本发明提供一种上述肽探针的应用，所述肽探针用于制备血清Cu(Ⅱ)及组织蛋白酶G的检测试剂盒。

第三方面，本发明提供一种包含上述肽探针的试剂盒。

进一步的，所述肽探针的剂型为冻干粉。

进一步的，所述肽探针的剂型为溶液。

进一步的，肽探针溶液的浓度为20μM，肽探针溶液由PBS缓冲液溶解肽探针冻干粉制备。

进一步的，PBS缓冲液的浓度为100mM，pH值为7.4。

进一步的，肽探针冻干粉的纯度为95％。

本发明的有益效果在于：

本发明提供的Y形肽探针的其中一条分支Suc-Val-Pro-Phe^P-(OPh)₂中包含一个特殊的P原子，当该序列被酶识别后，该P原子能够不可逆地攻击酶的丝氨酸部分，并形成共价键；另一条分支是Asp-Ala-His-Lys-孟加拉红，其中孟加拉红能起到光敏剂作用，该分支不仅具有捕获Cu(Ⅱ)的作用，更重要的是，其能够利用血液样品中的干扰蛋白实现检测信号的有效放大，具体原理如下：