[发明专利]一种嵌合抗原受体及其应用

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体包含CLDN3结合结构域、跨膜结构域、共刺激结构域、胞内信号传导结构域；其中，所述CLDN3结合结构域包含抗CLDN3单链抗体，所述抗CLDN3单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述共刺激结构域为来自CD28蛋白或4-1BB蛋白的共刺激信号分子，所述共刺激结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO.2或SEQID NO.3所示；所述跨膜结构域为来自CD28蛋白或CD8a蛋白的多肽，所述跨膜结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示；所述胞内信号传导结构域为包含CD3ζ的信号传导结构域，所述胞内信号传导结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。

3.根据权利要求1或2所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述CLDN3结合结构域通过铰链区与跨膜结构域相连接，所述铰链区为来自CD8a蛋白的多肽，所述铰链区的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；所述嵌合抗原受体还包含前导肽序列和标签序列；所述前导肽序列的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示；所述标签序列位于前导肽序列与CLDN3结合结构域之间，前导肽序列通过标签序列与CLDN3结合结构域相连接；所述标签序列为Poly-Arg、Poly-His、FLAG、Strep-tag II或c-Myc。

4.根据权利要求3所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO.9或SEQ ID NO.10所示。

5.与权利要求1～4任一所述嵌合抗原受体相关的生物材料，所述生物材料为下述B1)至B8)中的任意一种：

B1)编码权利要求1～4任一所述嵌合抗原受体的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体；

B4)含有B2)所述表达盒的重组载体；

B5)含有B1)所述核酸分子的细胞系；

B6)含有B2)所述表达盒的细胞系；

B7)含有B3)所述重组载体的细胞系；

B8)含有B4)所述重组载体的细胞系。

6.根据权利要求5所述的生物材料，其特征在于，B1)所述核酸分子为SEQ ID NO.11或SEQ ID NO.12所示的DNA分子。

7.一种CAR-T细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将权利要求1～4任一所述的嵌合抗原受体的编码基因导入T细胞中并使所述编码基因得到表达，得到CAR-T细胞。

8.按照权利要求7所述制备方法制备得到的CAR-T细胞。

9.权利要求1～4任一所述的嵌合抗原受体或权利要求5或6所述的生物材料在如下M1)-M4)中任一种中的应用：

M1)制备治疗或辅助治疗肿瘤的产品；

M2)制备杀伤肿瘤细胞的产品；

M3)制备生产CAR-T细胞的产品；

M4)生产CAR-T细胞。

10.一种治疗或辅助治疗肿瘤的产品，其特征在于，所述产品包含权利要求8所述的CAR-T细胞；所述肿瘤为CLDN3阳性的肿瘤。