[发明专利]筛选高效根瘤菌的快捷方法

权利要求书

1.一种筛选高效根瘤菌的快捷方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、采集根瘤，并将根瘤制备成菌液；

S2、制备高氮营养液和无氮营养液；

S3、用高氮营养液和无氮营养液分别培育两组幼苗，其中高氮营养液培育的幼苗为实验组幼苗，无氮营养液培育的幼苗为对照组幼苗；

S4、将菌液接种到S3中的两组幼苗上，形成实验组根瘤菌植株和对照组根瘤菌植株；

S5、将S4中两组植株进行培养，并观察对照组根瘤菌植株的结瘤情况，若出现明显根瘤，将实验组根瘤菌植株进行初次筛选，去除没有结瘤的植株；

S6、经过初次筛选的实验组根瘤菌植株冲洗后，转移到无氮营养液的瓶子中继续培养；

S7、培养一段时间后，检测植株的生长指标，筛选出综合指标最好的植株，将最大的根瘤取下，进行表面消毒、划线纯化及保藏。

2.根据权利要求1所述的筛选高效根瘤菌的快捷方法，其特征在于，所述步骤S1的具体步骤为：从田间采集长势旺盛、叶片浓绿的植株上的根瘤；将根瘤用水冲洗干净后，用镊子将根瘤夹碎，即获得菌液。

3.根据权利要求2所述的筛选高效根瘤菌的快捷方法，其特征在于，所述S3的培育幼苗步骤包括：

将大豆种子表面消毒后，放置在28℃的温箱中发芽，获得豆芽；

用高氮营养液/无氮营养液将500mL的瓶子灌满，并用铝箔封住瓶口；

将铝箔戳出洞口，将豆芽的根穿过洞口，伸到瓶子里的营养液中，即可获得植物培养瓶。

4.根据权利要求3所述的筛选高效根瘤菌的快捷方法，其特征在于：在步骤S3中，每一批幼苗培育中，高氮营养液培育的植物培养瓶为300～500瓶，无氮营养液培育植物培养瓶为3～5瓶。

5.根据权利要求4所述的筛选高效根瘤菌的快捷方法，其特征在于：在步骤S4中，每个植物培养瓶接种一个根瘤的菌液。

6.根据权利要求1所述的筛选高效根瘤菌的快捷方法，其特征在于，在步骤S5中，其培养条件为：光照培养箱或者温棚中培养14～20天。

7.根据权利要求1所述的筛选高效根瘤菌的快捷方法，其特征在于，在步骤S6中，其培养条件为：光照培养箱或者温棚中培养30～40天。

8.根据权利要求1所述的筛选高效根瘤菌的快捷方法，其特征在于，在步骤S7中，植株的生长指标包括株高、植株鲜重、根瘤鲜重、叶绿素含量。

9.根据权利要求1所述的筛选高效根瘤菌的快捷方法，其特征在于，所述高氮营养液的制备方法为：取0.000004g的CoCl₂·6H₂O、0.00286g的H₃BO₃、0.00182g的MnCl₂·4H₂O、0.00022g的ZnSO₄·7H₂O、0.0001g的CuSO₄·5H₂O、0.00012g的Na₂MoO₄·2H₂O、0.0493g的MgSO₄·7H₂O、0.17418g的K₂HPO₄、0.13688g的KH₂PO₄、0.111g的CaCl₂·2H₂O、0.005g的FeC₆H₅O₇·3H₂O、0.425g的NaNO₃，与纯水定容至1000mL。

10.根据权利要求1所述的筛选高效根瘤菌的快捷方法，其特征在于，所述无氮营养液的制备方法为：取0.000004g的CoCl₂·6H₂O、0.00286g的H₃BO₃、0.00182g的MnCl₂·4H₂O、0.00022g的ZnSO₄·7H₂O、0.0001g的CuSO₄·5H₂O、0.00012g的Na₂MoO₄·2H₂O、0.0493g的MgSO₄·7H₂O、0.17418g的K₂HPO₄、0.13688g的KH₂PO₄、0.111g的CaCl₂·2H₂O、0.005g的FeC₆H₅O₇·3H₂O，与纯水定容至1000mL。