[发明专利]一种单糖的分析方法

权利要求书

1.一种用于测定单糖的HPLC方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：

(1)通过高效液相对样品中的单糖进行测定；

所述的高效液相的色谱条件为：

色谱柱：反相色谱柱；

流动相：流动相A和流动相B，所述的流动相A包括乙腈；所述的流动相B包括柠檬酸盐缓冲液和四氢呋喃的混合液；和

流动相洗脱：所述的流动相洗脱为梯度洗脱，所述的梯度洗脱的顺序为：

其中，(v/v％)是指占流动相的体积分数，其中，0-25min时，流动相A(v/v％)的体积分数保持为1％，流动相B的体积分数保持为99％；25-30min时，流动相A(v/v％)的体积分数为从1％匀速上升到7％，流动相B(v/v％)的体积分数为从99％匀速下降到93％；30-56min时，流动相A(v/v％)的体积分数为从7％匀速下降到1％，流动相B(v/v％)的体积分数为从93％匀速上升到99％。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法为定量和/或定性方法。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的单糖包括葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、核糖、岩藻糖、鼠李糖和2-脱氧-D-核糖中的一种或多种。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述葡萄糖醛酸包括D-葡萄糖醛酸；

所述半乳糖醛酸包括D-半乳糖醛酸；

所述半乳糖包括D-半乳糖；

所述葡萄糖包括D-葡萄糖；

所述阿拉伯糖包括L-阿拉伯糖；

所述核糖包括D-核糖；

所述岩藻糖包括D-岩藻糖；和/或

所述鼠李糖包括L-鼠李糖。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的流动相B中，柠檬酸盐缓冲液与四氢呋喃体积比为(80-95)∶(5-20)，较佳地(85-93)∶(8-15)，更佳地(86-90)∶(10-14)，更佳地(87-89)∶(11-13)，最佳地88∶12。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的流动相B中，柠檬酸盐缓冲液的pH为3-7，较佳地4.0-6.0，更佳地4.5-5.5，更佳地4.8-5.2，最佳地5.0。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的高效液相还具有选自下组的一种或多种色谱条件：

色谱柱温度：25-35℃，较佳地28-32℃，更佳地30℃；和/或

流动相(流动相A+流动相B)流速：0.2-3mL/min，较佳地0.5-1.5mL/min，更佳地0.6-1.0mL/min，最佳地0.8mL/min。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的反相色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤(1)包括：先用衍生化试剂对样品中的单糖进行衍生化，得到含有衍生化的单糖的样品后，然后进样HPLC，从而测定单糖。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述的衍生化试剂包括0.1-4重量份氰基硼氢钠、0.4-9重量份4-氨基苯甲酸乙酯、0.1-2重量份硼酸、2-15重量份醋酸和40-50重量份甲醇。