[发明专利]一种跨空间抗原递送纳米粒及其制备方法和在制药中应用

说明书

本发明属生物技术领域，具体涉及一种跨空间抗原递送纳米粒及其制备方法和在于制备抗肿瘤药物中的应用。本发明的基于介孔硅MSN与碳量子点CD的纳米粒，负载化疗药物后表面连接TKD多肽。所书的纳米粒能有效发挥各组分的优势，用于化疗和免疫联合治疗乳腺癌，疗效比单一治疗方案更优。本发明的跨空间抗原递送纳米粒DCMPT，与单纯MSN相比，能降解并吸附抗原；与CD相比，能初始靶向肿瘤并负载大量药物；与修饰了TKD的其他载体相比，能实现抗原从肿瘤到脾脏的跨空间递送。本发明的高效低毒的跨空间抗原递送纳米粒能充分发挥化疗和免疫治疗的优势，有效提高肿瘤的治疗和预后效果。

技术领域

本发明属生物技术领域，涉及抗原递送纳米粒，具体涉及一种跨空间抗原递送纳米粒及其制备方法和在用于制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

现有技术公开了肿瘤是机体正常细胞恶变的产物，其特点是不断增殖并在体内转移，肿瘤细胞在免疫学上的突出特点是出现某些在同类正常细胞中看不到的新的抗原标志。机体的免疫系统通过多种途径消除肿瘤细胞或抑制其增长。

研究显示，尽管机体内具有一系列的免疫监视机制，但仍难以阻止肿瘤的发生和发展。少量肿瘤细胞不易引起机体应答，待肿瘤生长至一定程度，超越了机体免疫应答的能力，肿瘤细胞即得以逃逸。肿瘤免疫逃逸的机制涉及多个免疫应答环节，其中最主要的原因来自于肿瘤微环境的免疫抑制，如免疫检查点、IDO酶、乏氧环境、Treg比例较大等多种因素多种机制的共同作用。

有研究公开了有关如何改善肿瘤微环境中的免疫抑制因子，采用诸如免疫检查点抑制剂、IDO酶抑制剂、富氧材料等方式扭转肿瘤微环境中的免疫抑制状态，但由于免疫抑制的作用机制复杂，单一改善某种抑制因素的治疗方式往往呈现阳性率偏低的特点。在针对肿瘤免疫抑制环境的基础研究短时间内难以取得突破性进展的前提下，如何有效地避免肿瘤抑制并呈递肿瘤抗原到抗原提呈细胞激活针对肿瘤的特异性免疫引起本技术领域技术人员的关注。

基于现有技术的现状，本申请的发明人拟提供新的抗原递送纳米粒，具体涉及一种跨空间抗原递送纳米粒的制备方法及其在用于制备抗肿瘤药物中的应用；本申请的抗原递送纳米粒将有助于实现肿瘤抗原的跨空间递送。

发明内容

本发明的目的是基于现有技术的现状，提供新的抗原递送纳米粒，具体涉及一种跨空间抗原递送纳米粒及其制备方法及其在用于制备抗肿瘤药物中的应用；本申请的抗原递送纳米粒将有助于实现肿瘤抗原的跨空间递送；尤其应用于乳腺癌的联合治疗。

本发明使用碳量子点参杂的介孔硅CM作为支撑材料，表面连接PEG-TKD实现长循环与双靶向(先靶向肿瘤细胞，降解后靶向DC细胞)，同时在介孔中负载了化疗药物在肿瘤原位进行杀伤并暴露抗原。本发明中，基于由TKD介导的肿瘤靶向首先使得粒径约100nm的材料靶向肿瘤，被内吞进入肿瘤细胞，由于肿瘤溶酶体的酸性环境，导致系统与药物之间的疏水作用力减弱，化疗药物释放并杀伤肿瘤，使得肿瘤抗原大量暴露；另一方面材料降解，粒径缩小到10～30nm，同时降解后的碎片具有大量的π-π共轭结构，能够有效地吸附暴露的肿瘤抗原。

本发明中，得益于材料的粒径缩小与TKD对于DC细胞的靶向作用，负载了肿瘤抗原的材料能够进一步从肿瘤靶向到APC细胞，从而实现肿瘤抗原的跨空间递送。

本发明中，借由TKD介导的溶酶体途径的内吞使得肿瘤抗原能在APC细胞中进一步经过抗原处理形成抗原多肽，与MHC形成抗原抗体复合物并呈递到APC细胞表面，后续进一步激活T细胞形成特异性肿瘤免疫。

更具体的，本发明的跨空间抗原递送纳米粒通过下述方法制备，其包括步骤：

步骤(1)：精确称量红光碳量子点CD分散于适量体积的去离子水溶液，记为溶液A。将定量的3-氨丙基三乙氧基硅烷APTES与定量的正硅酸丁酯TBOS混合均匀，记为溶液B。将A、B两溶液同时添加进一定体积的去离子水，并用TEA调整pH到一定值，一定温度搅拌一定时间，离心水洗醇洗冻干后获得CM。