[发明专利]一种湿地植被土壤微生物磷检测方法

权利要求书

1.一种湿地植被土壤微生物磷检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1，采样：

水质层取样，水质层中部采用吸管取样，得到水样1；

水土交界面取样，水土交界面采用吸管或取样器取样，得到水土混合样2；

土质层取样：土质层取样采用取样器在土层下5～10cm取样得到浅土壤样3，在土层下15～30cm取样得到深土壤样4；

步骤2，分样：

将水样1分为样A1、样B1、样C1、样D1四种；将水土混合样2分为样A2、样B2、样C2、样D2四种；将浅土壤样3分为样A3、样B3、样C3、样D3四种；将深土壤样4分为样A4、样B4、样C4、样D4四种；

步骤3，处理样A1、A2、A3和A4：

等质量称取样A1、样A2、样A3和样A4，分别加入硅粉或去离子水拌合均匀，制成含水量在20～30％的拌合样A1、拌合样A2、拌合样A3和拌合样A4；

将拌合样A1、拌合样A2、拌合样A3和拌合样A4，摊平至薄层，进行氯仿熏蒸，除去氯仿后，分别加入碳酸氢钠浸提两次，过滤两次，保留滤液，得到滤液A1、滤液A2、滤液A3和滤液A4；

步骤4，处理样B1、B2、B3和B4：

等质量称取样B1、样B2、样B3和样B4，分别加入硅粉或去离子水拌合均匀，制成含水量在20～30％的拌合样B1、拌合样B2、拌合样B3和拌合样B4；

将拌合样B1、拌合样B2、拌合样B3和拌合样B4，分别直接加入碳酸氢钠浸提两次，过滤两次，保留滤液，得到滤液B1、滤液B2、滤液B3和滤液B4；

步骤5，模拟环境培养样及处理样C1、C2、C3和C4：

等质量称取样C1、样C2、样C3和样C4，置于液体培养基的培养皿中，进行温湿度湿地环境模拟培养25天后，取出；分别加入硅粉或去离子水拌合制成含水量在20～30％的拌合样C1、拌合样C2、拌合样C3、拌合样C4，摊平至薄层，进行氯仿熏蒸，除去氯仿后，分别加入碳酸氢钠浸提两次，过滤两次，保留滤液，得到滤液C1、滤液C2、滤液C3和滤液C4；

步骤6，模拟环境培养样及处理样D1、D2、D3和D4：

等质量称取样D1、样D2、样D3和样D4，置于液体培养基的培养皿中，进行温湿度湿地环境模拟培养25天后，取出；分别加入硅粉或去离子水拌合制成含水量在20～30％的拌合样D1、拌合样D2、拌合样D3、拌合样D4；

将拌合样D1、拌合样D2、拌合样D3和拌合样D4，分别直接加入碳酸氢钠浸提两次，过滤两次，保留滤液，得到滤液D1、滤液D2、滤液D3和滤液D4；

步骤7，中和、定容：

在滤液A1、滤液A2、滤液A3、滤液A4、滤液B1、滤液B2、滤液B3、滤液B4、滤液C1、滤液C2、滤液C3、滤液C4、滤液D1、滤液D2、滤液D3和滤液D4中分别加入盐酸，调节pH值为6～6.5，定容制成待测样；

步骤8，测定：

采用钼锑抗分光光度法，仪器测定待测样中磷的含量；

步骤9，计算：

计算当前水样1中微生物磷含量n1、当前水土混合样2中微生物磷含量n2、当前浅土壤样3中微生物磷含量n3、当前深土壤样4中微生物磷含量n4、预后水样1中微生物磷含量m1、预后水土混合样2中微生物磷含量m2、预后浅土壤样3中微生物磷含量m3和预后深土壤样4中微生物磷含量m4；

步骤10，判断：

根据计算结果，绘制当前含量折线图和预后斜率图，判断湿地植被不同样点土壤微生物磷含量状况，以及确定不同样点微生物磷的含量增长斜率，根据走势评估湿地植被土壤环境好坏。

2.根据权利要求1所述的一种湿地植被土壤微生物磷检测方法，其特征在于，步骤1中，所述水样1、水土混合样2、浅土壤样3和深土壤样4为单点取样或多点平行取样。

3.根据权利要求1所述的一种湿地植被土壤微生物磷检测方法，其特征在于，步骤1中，所述水样1、水土混合样2、浅土壤样3和深土壤样4采样后清理动、植物杂质。

4.根据权利要求1所述的一种湿地植被土壤微生物磷检测方法，其特征在于，步骤2中，所述样A1、样B1、样C1、样D1、A2、样B2、样C2、样D2、样A3、样B3、样C3、样D3、样A4、样B4、样C4和样D4为单份样或者多份平行样。