[发明专利]TNF-α与LPS联用在构建肠道氧化应激细胞模型中的应用

说明书

本发明提供了TNF‑α与LPS联用在构建肠道氧化应激细胞模型中的应用。通过采用LPS对肠道细胞进行处理，以及将TNF‑α与LPS联用对肠道细胞进行处理，发现肠道细胞中的活性氧、HO‑1和NQO‑1均显著提高，说明LPS单用、TNF‑α与LPS联用均可成功构建肠道氧化应激细胞模型。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域。更具体地，涉及TNF-α与LPS联用在构建肠道氧化应激细胞模型中的应用。

背景技术

健康状态的肠道细胞在代谢过程中，会产生许多自由基，这些自由基通常不会导致肠道细胞的损伤，因为肠道细胞通过自身的抗氧化防御体系可保持体内活性氧(ROS)、血红素加氧酶-1(HO-1)和醌氧化还原酶1(NQO-1)之间的平衡状态，避免自由基对细胞造成损伤。但当生物体处在病理状态或受到环境中不良因素的刺激时，其肠道细胞内的活性氧(ROS)很可能会显著增多，导致细胞内产生的自由基水平高于细胞自身的抗氧化防御能力，使其氧化还原状态发生失衡，进而诱发氧化应激。氧化应激会导致肠道细胞发生死亡和不可修复的氧化损伤，肠道细胞发生氧化应激后，肠道的屏障功能会发生恶化，可能会使有害物质或病原进入血液，导致消化系统的疾病。然而时至今日，研究者们对肠道细胞氧化刺激发生发展的机制了解得仍不充分，临床上也缺乏对肠道细胞氧化刺激的有效防治策略和治疗措施。

应用模型模拟疾病，寻找潜在的分子机制和治疗靶点，为疾病的研究提供了极大的便利。目前肠道细胞氧化应激研究模型主要有动物模型和细胞模型，而仅利用动物模型进行肠道细胞氧化应激方面的研究往往存在一些不便与局限：(1)在日益关注动物福利的当今科学界，大量使用动物试验不符合国际舆论趋势；(2)肠道环境异常复杂，构建的动物模型无法准确判断是氧化应激直接影响的肠道细胞还是通过肠道菌群转化后产物间接影响的肠道细胞；(3)动物模型为了获得稳定的统计数据，往往要求样本大，且试验周期长，采样需要大量熟练操作者，其试验成本之高，是一些研究者难以负担的；(4)目前许多氧化应激模型是全身性的氧化应激造模，对肠道细胞的针对性不强等。基于此，构建合适的细胞模型作为动物模型的补充显得十分必要，细胞模型不仅具有研究对象直接、稳定性好、可重复性强、试验成本相对较低等一些体外培养共有的优点，更是在建立快速的营养物质跨膜运输能力评定、研究肠道菌群和肠壁的直接作用、实时观测肠道细胞在应激状态下表现等方面具有体内研究无法替代的优势。

鲍明隆等公开了脂多糖(LPS)会诱导构建小鼠肠道产生过量的活性氧(ROS)，诱发氧化应激(鲍明隆,孙心怡,梁梅,巨向红,雍艳红,马兴斌,于志超,郭依莹,刘晓曦.黄芩苷通过抑制核因子-κB和激活核因子-E2相关因子2信号通路缓解脂多糖诱导的小鼠空肠炎症和氧化应激[J/OL].动物营养学报:1-13[2022-01-20].http://kns.cnki.net/kcms/detail/11.5461.s.20211221.0910.004.html.)，即脂多糖可用于构建肠道氧化应激的动物模型，但动物模型与细胞模型并不能简单转用，且目前构建肠道氧化应激细胞模型的相关研究仍十分匮乏。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，旨在提供一种单用LPS，或TNF-α与LPS联用在构建肠道氧化应激细胞模型中的应用，为肠道细胞氧化应激疾病提供复制和研究的工具。

本发明的首要目的是提供LPS在构建肠道氧化应激细胞模型中的应用。

本发明的另一目的是提供TNF-α与LPS联用在构建肠道氧化应激细胞模型中的应用。

本发明的又一目的是提供一种肠道氧化应激细胞模型的构建方法。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明通过采用LPS对肠道细胞进行处理，发现肠道细胞中的活性氧、HO-1和NQO-1均显著提高，说明LPS可成功构建肠道氧化应激细胞模型，因此，LPS在构建肠道氧化应激细胞模型中的应用应在本发明的保护范围之内。