[发明专利]一种海参通用扩增引物、扩增方法及应用在审
| 申请号： | 202210089840.4 | 申请日： | 2022-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN114703290A | 公开（公告）日： | 2022-07-05 |
| 发明（设计）人： | 罗鹏;夏淑贤;鄂子譞;尹佳悦;胡超群;马波;任春华;王艳红 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南海海洋研究所;南方海洋科学与工程广东省实验室（广州） |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星;朱聪聪 |
| 地址： | 511458 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 海参 通用 扩增 引物 方法 应用 | ||
1.一种海参通用扩增引物，其特征在于，靶引物序列如下：
16S-NUF:GTCATCATGACCGTTCTGCAACCGTGCDAAGGTAGCATAAT；
16S-NUR:CAGGGTACGGATGTGCGAGCGTCGGTCTGAACTCAGATCATG。
2.一种鉴别海参的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的海参通用扩增引物。
3.一种鉴别海参的方法，其特征在于，提取待测样品的DNA，然后以权利要求1所述的海参通用扩增引物进行PCR扩增，如果扩增片段的大小约为511bp，则是海参，否则则不是。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的PCR扩增，其PCR反应体系为：DNA模板0.5-1.5μL，5-15μM上游引物和5-15μM下游引物各0.5-1.5μL，Premix ExTaq酶25μL，用灭菌水补足至50μL。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的PCR扩增，其PCR反应体系为：DNA模板1.0μL，10μM上游引物和10μM下游引物各1.0μL，Premix ExTaq酶25μL，用灭菌水补足至50μL。
6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的PCR扩增，其PCR反应程序为：94℃预变性2-5min；94℃变性15-60sec，54-58℃退火20-40sec，72℃延伸30-90sec，30-35个循环；72℃延伸4-6min。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的PCR反应程序为：94℃预变性4min；94℃变性30sec，56℃退火30sec，72℃延伸60sec，32个循环；72℃延伸5min。
8.权利要求1所述的海参通用扩增引物在鉴别海参中的应用。
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