[发明专利]一种唾液保存液及使用方法

说明书

本发明涉及无创基因检测诊断技术领域，具体来说是一种唾液保存液及使用方法，唾液保存液，包括0.1‑0.2mol/L的氯化钠溶液，体积比为0.03‑0.06%的Proclin300，0.1‑0.5g/L的庆大和两性霉素溶液，5‑15mM的乙二胺四乙酸二钠盐溶液，30‑50mM的三（羟甲基）氨基甲烷‑盐酸缓存溶液，体积比为3‑8%的Trition‑X 100，120‑150mL/L的乙二醇溶液。本发明保存液在常温保存唾液14天、‑20℃保存唾液30天情况下，仍可提取出与新鲜唾液浓度纯度相当的DNA，且在‑20℃下保持液体，不结冰；保存液不含胍盐，叠氮化钠等有毒有害的防腐剂，使用的是防腐剂Proclin300，安全环保。

技术领域

本发明涉及无创基因检测诊断技术领域，具体来说是一种唾液保存液及使用方法。

背景技术

当前科研人员和临床医生主要用抗凝血提取DNA，然而抗凝血保存时间不宜过长，容易形成血块，给提取带来了不便。提取血液中的DNA还需专业的人员进行采血，需要配备注射器、消毒用具等。并且有些老人小孩对抽血比较抗拒，无法随时随地采集样本。近些年来，科研和医药领域逐渐从唾液中提取DNA，人体唾液99％是水，有机物有唾液淀粉酶、粘多糖、粘蛋白及溶菌酶等，无机物有钠离子、钾离子、钙离子、氯离子等，同时还含有多种细菌、口腔脱落细胞等。唾液中的口腔细胞，包含着人体的全套基因组，唾液DNA与血液里的DNA一致，而唾液样本采集对个体无创伤，无痛，可多次取样，便于操作。

但是唾液的成分复杂，酶、粘液、细菌等杂质会导致唾液DNA的降解和阻碍DNA的提取，还大大降低唾液的新鲜度，所以我们需要一款可以长时间保存唾液DNA的保存液。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术的不足，提供常温、-20℃低温下均可有效保存核酸的一种安全环保的唾液保存液。既可以常温下至少保存唾液14天，也可以在-20℃下至少保存唾液30天，且保存液不结冰。保存液结冰后融化会破坏核酸，几次冻融就会让核酸的含量与完整性遭到破坏，本发明防冻不结冰的保存液可以长期有效地保护核酸不受破坏。

为了实现上述目的，设计一种唾液保存液，包括0.1-0.2mol/L的氯化钠溶液，体积比为0.03-0.06％的Proclin300，0.1-0.5g/L的庆大和两性霉素溶液，5-15mM的乙二胺四乙酸二钠盐溶液，30-50mM的三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸缓存溶液，体积比为3-8％的Trition-X 100，120-150mL/L的乙二醇溶液。

优选地，保存液所有组分均用无菌去离子水溶解。

优选地，所述保存液pH为7.0-8.0。

又发明了一种保存液的使用方法，使用时，唾液与保存液质量体积比为1:5。

本发明同现有技术相比，其优点在于：

1.本发明保存液在常温保存唾液14天、-20℃保存唾液30天，仍可提取出与新鲜唾液浓度纯度相当的DNA。

2.保存液在-20℃下保持液体，不结冰，避免保存液结冰后融化破坏核酸，导致核酸的含量与完整性遭到破坏这种情况发生。

3.本产品不含胍盐，叠氮化钠等有毒有害的防腐剂，使用的是防腐剂Proclin300，安全环保。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明，本发明的原理对本专业的人来说是非常清楚的。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

取新鲜唾液，保存到本产品的保存液中，唾液与保存液的比例约为1：5，充分混匀，密封常温保存。

1.测试不同保存条件下所提取出的DNA情况

实施例1(常温保存0天)