[发明专利]一种高效焕活溶液及其制备方法、保存方法和应用

说明书

本申请涉及临床医疗美容的技术领域，具体公开了一种高效焕活溶液及其制备方法、保存方法和应用。一种高效焕活溶液的制备方法，包括以下步骤：将抗凝剂和离体全血样品按照体积比为1：（9‑10）的比例混合均匀后，经过血细胞分离机进行离心分离，离心后提取出富血小板血浆，备用作为高效焕活溶液；本申请的高效焕活溶液该组合物可用于皮肤真皮层，其具有良好的修复效果，能够促进细胞的繁殖和分化、增加胶原合成能力，促进基质合成和组织再生的优点。

技术领域

本申请涉及临床医疗美容的技术领域，更具体地说，它涉及一种高效焕活溶液及其制备方法、保存方法和应用。

背景技术

富血小板血浆是通过离心自体全血而得到的高浓度血小板血浆，其中包括血小板、白细胞和血浆蛋白、肽类物质（血小板生长因子家族）等活性成分，对促进细胞的繁殖和分化、增加胶原合成能力，促进基质合成和组织再生有重要作用，此外生长因子之间有良好的协调作用，故富血小板血浆常用于组织修复及美容抗衰领域。

目前，相关的富血小板血浆的提取技术已经在欧洲、北美、南非、中东地区、澳洲、日本、新加坡等发达国家和地区得到了广泛的临床应用。

但相关的富血小板血浆的提取过程存在着提取量少，纯度不高，富血小板血浆浓度低的问题，提取出的富血小板血浆生长因子分泌活跃性差，保存时间短，同时还带有外源的感染风险。

发明内容

为了提高富血小板血浆的提取效果，延长保存时间，本申请提供一种高效焕活溶液及其制备方法、保存方法和应用。

第一方面，本申请提供一种高效焕活溶液的制备方法，采用如下的技术方案：

一种高效焕活溶液的制备方法，包括以下步骤：

将抗凝剂和离体全血样品按照体积比为1：（9-10）的比例混合均匀后，经过血细胞分离机进行离心分离，离心后提取出富血小板血浆，备用作为高效焕活溶液；所述抗凝剂包括枸橼酸钠；

所述离体全血样品和抗凝剂进入血细胞分离机内时均在封闭管路中流动，一次离心后出现界面分层，先将红细胞等重组分分离出后，剩余的轻组分进行二次离心，二次离心后分离出的较重组分即为富血小板血浆。

通过采用上述技术方案，全血样品先和抗凝剂在1：（9-10）的体积比下进行混合，在此范围内取值对混合效果影响在可预期范围内，保证全血样品在进行离心时不易因为血凝而造成离心效果不佳的问题；枸橼酸钠作抗凝剂，由于全血中的钙离子是凝血过程中所需的物质之一，枸橼酸根能够与全血中的钙离子形成难解离的络合物，从而使全血中的钙离子减少，起到阻止血液凝固的效果，保证全血样品的流动性，使其能够在离心后更好的分层。

一方面，全血样品在血细胞分离机内先经过一次分离，使红细胞等重组分先分离出去，然后再对剩下的轻组分进行二次分离，二次分离后分离处的较重组分即为富血小板血浆，保证了富血小板血浆的提取量，同时提高了富血小板血浆的浓度和纯度；另一方面，全血样品进入血细胞分离机内始终在封闭的管路中流动，有效降低了外源的感染风险。

优选的，所述抗凝剂包括枸橼酸钠8-12份和甘氨酸4-6份。

通过采用上述技术方案，抗凝剂的加入虽然能够起到减少血液凝固的效果，但由于枸橼酸钠的pH值为8，而血小板的适宜保存环境的pH值为6.5-7.2，故单一采用枸橼酸钠作抗凝剂时容易造成血小板的破损，影响富血小板血浆的性能，不利于富血小板血浆的持续保存；因此加入甘氨酸使得抗凝剂的整体pH值处于适合血小板保存的条件，减少血小板在提取或保存时出现破裂的情况，使得富血小板血浆能够分泌大量的生长因子，促进组织再生。

另外甘氨酸还具有络合钙离子的能力，加入甘氨酸能够起到辅助抗凝的效果，减少血液凝固，使全血样品能够更好的进入血细胞分离机进行分离。

优选的，所述抗凝剂还包括维生素E3-6份。