[发明专利]一种慢性胰腺炎疾病模型及其制备方法

说明书

本发明公开了生物医学领域的发明一种用于生物医药研究评价的胰腺炎疾病模型及其制备方法，该发明具有材料来源广泛、成功率高、重复性好、模型观察周期长、制备操作简便、不易自行恢复的特点，适用于发病机制、药品、医疗器械、生物医学材料的研究与评价。

技术领域

本发明涉及生物医学领域的一种慢性胰腺炎实验动物模型及制备方法，用于胰腺病、胆源性慢性胰腺炎、胰源性糖尿病、肠源性糖尿病等相关疾病的研究以及药物的有效性和安全性评价。

背景技术

慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)是由于各种原因导致的胰腺局部或弥漫性的慢性进展性炎症，伴随胰腺内外分泌功能的不可逆损害，继发胰腺消化酶分泌不足和糖尿病等病症。CP属于中医“腹痛”“胃脘痛”“泄泻”“症瘕积聚”等病症范畴，其病机为：饮食不调或外邪入里，肠胃积热所致的胃脘部痞塞不通、脾运不及；肝胆湿热蕴结于肝胆，使之失于疏泄条达。临床上表现为反复发作性或持续性腹痛、腹泻或脂肪泻、消瘦、黄瘟、腹部包块和消渴症。

CP实验模型是研究开发治疗CP药物、阐明药物药理毒理学机制的前提条件和研究基础。目前尚无完全模拟人类CP的实验动物研究模型，因此，研究开发具有操作简便、成功率高、一致性好、造模时间周期短、病变持续时间较长的实验动物模型具有重要意义。目前，构建CP实验模型的方法主要有侵入式和非侵入式2类。

侵入式制备CP模型主要基于手术方式，包括胰腺导管结扎法(Partial DuctLigation,PDL)和胆管逆行注射法。胰腺导管结扎法原理是通过结扎胰腺导管，造成导管局部堵塞，引起胰液排泻障碍、胰管高压、胰液溢出，诱使胰酶在胰腺异常活化，从而导致急性胰腺炎的发生。胰腺导管结扎法7～14天死亡率接近100％。胆管逆行注射法是通常向胰腺导管注射化学试剂的方法诱导急慢性胰腺病变，常用的化学试剂是三硝基苯磺酸，该方法手术要求较高和手术难度较大，且手术过程耗时长，影响实验动物的存活率，实验结果干扰因素多。

非侵入模型是指不需要对动物实施手术，操作过程相对简单。主要采用腹腔、静脉途径将化学试剂注入血管或局部形成胰腺炎。造模剂主要包括：二丁基二氯化锡、乙醇、二乙基二硫代氨基甲酸盐、L-精氨酸、雨蛙素、脂多糖等。注射法所致胰腺纤维化较为显著，但不足之处在于对注射部位或其他脏器具有非特定的损伤作用，急性期死亡率较高。此外，通过高脂饮食喂饲也能建立CP实验动物模型，但是这种食物诱导法存在模型建立周期长的不足。

胆囊动力学与胆道流变学改变所致的胆系疾病可诱发胆源性慢性胰腺炎，诱发病变的类型包括胆囊排空降低、胆道梗阻、胆汁引流不畅等病症，这些疾病诱因与疾病本身常常互为因果，复发加剧胰腺损害和胆道梗阻。

本发明构建了一种胆管伴十二指肠结扎法(Bile Duct and Duodenum Ligation，BDDL)诱发的CP实验动物研究模型，该模型能直接造成胆管动力学改变和十二指肠胰段梗阻，诱发胆管异常梗阻，胰管壶腹部压力失衡，导致胰腺分泌功能失调，出现细胞自身消化、凋亡、组织结构破坏、内外分泌功能减退的实质性损害表现，进而造成继发胰腺组织炎症、纤维化，继发血糖调节功能紊乱和消化功能不足等的慢性胰腺炎病症。

发明内容

本发明的目的：针对现有技术的不足，发明一种CP动物疾病模型，该动物疾病模型具有操作过程简便、成功率高、稳定性好，重复性好、观察周期长、不易自行恢复的特点，应用于药品、医疗器械、生物活性材料的研究评价和胰腺炎发病机制研究。

为实现上述发明目的，通过以下技术方案实现：

1.方法设计

1.1.动物分组

实验大鼠随机分为假手术组、模型对照组、BDDL组、BDDL+药物组。

1.2.仪器设备

生物组织脱水机、生物组织包埋机、切片机、生物显微镜。

2.操作实施