[发明专利]杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX‑002发酵提取物以及其作为活性成分在制备清除DPPH自由基的药物或保健品中的应用。本发明提供的杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX‑002发酵提取物具有明显的抗氧化活性，且可有效消除DPPH自由基，在制备新型抗氧化药物/保健品方面具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与应用。

背景技术

随着我国的经济发展和人民生活水平的提高，人们的饮食结构、生活方式都发生了很大的改变，但各类疾病也随之而来。研究表明大量疾病的发展都与氧化应激有关，如癌症、心脏病、老年痴呆等。当细胞产生的自由基和抗氧化剂不平衡导致机体内过量的活性氧(reactive oxygen species,ROS)积聚就可能发生氧化应激。

目前抗氧化药物主要分为直接抗氧化药物和间接抗氧化药物两种。直接抗氧化药物能够以适当的浓度到达病变部位,并与机体产生的ROS迅速反应,起到直接抗氧化作用；间接抗氧化药物则是通过激活细胞内抗氧化信号通路,诱导抗氧化蛋白的表达达到清除ROS的目的。然而现有的抗氧化药物只能抑制ROS 的产生或清除ROS。

另一方面，杨叶肖槿是一种广泛分布于亚欧非、大洋洲的红树植物，其是一种常见的民间药用植物，具有广泛的药学用途。如杨叶肖槿的树皮可用来治疗痢疾、皮肤疾病；叶子可消炎消肿，果实分泌液可制备皮癣。目前关于杨叶肖槿的研究也多局限于研究其各部位的成分以及药用机理，并未有对其内生真菌的相关研究。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，提供一种具有药用价值的杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与应用。

具体的，本发明提供了杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002发酵提取物作为活性成分在制备清除DPPH自由基的药物或保健品中的应用。发明人通过研究发现，杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002发酵提取物具有明显的抗氧化作用，且可清除DPPH自由基，即其在制备新型抗氧化药物/保健品方面具有广泛的应用前景。该菌种已于2022年1月4日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址为广东省广州市，保藏号为GDMCC NO:62179。

具体的，该Penicillium sp.YX-002发酵提取物的制备方法包括以下步骤：

(1)将杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002接种至培养基中，发酵得到发酵产物；

具体的，步骤(1)包括：

(1.1)将杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002活化；

具体的，将杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002置于温度为20～30℃、湿度为60～90％(RH)的培养箱中活化。

(1.2)将活化后的杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002接种至海水马铃薯培养基，培养得到孢子液；

具体的，海水马铃薯培养基的组成为：马铃薯汁100～800mL/L，葡萄糖 10～50g/L，蛋白胨0.5～10g/L，海盐5～50g/L。接种前在0.5×10⁵～3×10⁵Pa下灭菌 10～40min。优选的，在本发明的一个实施例中，海水马铃薯培养基的组成为：马铃薯汁500mL/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L，海盐20g/L。

其中，马铃薯汁的制备方法为：马铃薯去皮，洗净切块，加入去离子水，加热煮沸10～30min，过滤即得，每100g马铃薯煮100mL土豆汁。

具体的，接种量为10～20g菌落平板/400mL培养基。接种后在摇床培养3～4 天，得到孢子液。