[发明专利]一种乙酰基四肽-3中对映异构体的分离分析方法及其应用

说明书

本发明公开了一种乙酰基四肽‑3中对映异构体的分离分析方法及其应用。本发明采用高效液相色谱法进行分离分析，其中，选用亲水性十八烷基硅烷键合硅胶柱，使用浓度为体积百分比0.05～0.15％的有机酸溶液以0.2～1.0mL/min的流速进行洗脱，能有效对乙酰基四肽‑3及其对映异构体进行了分离分析，分离度达到1.5及以上。本发明避免使用有机试剂，环保及对人体毒害小；且本发明避免配置特殊仪器，操作简便，成本低。

技术领域

本发明属于制备和检测分析领域，特别涉及一种乙酰基四肽-3中对映异构体的分离分析方法及其应用。

背景技术

由于氨基酸多为手性分子(甘氨酸除外)，在多肽合成的过程中不可避免的存在对映异构体杂质的产生，或由氨基酸原料引入，这可能导致其生物活性的改变。因此，应对多肽合成中的对映异构体杂质进行控制。

对于氨基酸、较短的多肽的对映异构体杂质检测，以及化学药物的对映异构体杂质检测，通常采用正相手性色谱柱法、柱前或柱后衍生法、流动相手性添加剂法。正相手性色谱柱法通常具有耗时较长、灵敏度低、操作复杂、毒性较大、需要配置专用仪器的缺点。柱前或柱后衍生法对实验操作和试剂的要求比较高，还有衍生产物不单一的问题。流动相手性添加剂法分离效果不稳定，色谱柱寿命短，且灵敏度很低。如果有反相色谱法可以分离某些化妆品多肽的对映异构体杂质，也会用到甲醇、乙腈等有机试剂，有一定的毒性。

乙酰基四肽-3是一种含有4个氨基酸的化妆品多肽，氨基酸序列为Ac-Lys-Gly-His-Lys-NH2，CAS号为827306-88-7，具有促进毛发生长的作用。

现有技术尚无乙酰基四肽-3中对映异构体的分离分析方法。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种乙酰基四肽-3中对映异构体的分离分析方法。

本发明的另一目的在于提供上述乙酰基四肽-3中对映异构体的分离分析方法的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种乙酰基四肽-3中对映异构体的分离分析方法，包括如下步骤：采用高效液相色谱法进行分离分析，色谱条件包括如下参数：

色谱柱：亲水性十八烷基硅烷键合硅胶柱；

流动相：浓度为体积百分比0.05～0.15％的有机酸溶液。

所述的亲水性十八烷基硅烷键合硅胶柱优选为Ultimate ALK C18色谱柱。

所述的有机酸优选为甲酸、乙酸和磷酸中的一种以上。

所述的有机酸溶液的浓度优选为体积百分比0.1％。

所述的色谱条件中的洗脱为等度洗脱。

所述的等度洗脱的时间为10min以上；优选为20min。

所述的洗脱的流速为0.2～1.0mL/min；更优选为0.5～1.0mL/min。

所述的色谱条件还包括如下条件：检测波长200～220nm；柱温20～30℃。

所述的检测波长优选为210nm。

所述的柱温优选为25℃。

所述的色谱条件还包括：进样量为5μL。

上述乙酰基四肽-3中对映异构体的分离分析方法在分离和/或分析乙酰基四肽-3样品中的乙酰基四肽-3对映异构体中的应用。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

1、本发明首次对乙酰基四肽-3及其对映异构体进行了分离分析，分离度达到1.5及以上；

2.本发明避免使用有机试剂，环保及对人体毒害小；