[发明专利]一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型及其评价方法

说明书

本发明涉及实验动物模型技术领域，公开了一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型，该模型实现方法包括以下步骤：S1、选材分组；S2、模型复制；S3、模型评价；S4、指标检测；S5、统计学处理；S6、模型验证。本发明通过给予模型大鼠高脂低蛋白饲料，每日负重后放于自制泳池中游泳至力竭，6周后评估模型；该造模方法并未直接对大鼠肺脏造成损伤，且其导致脾气虚过程十分缓和，复合虚证病程绵延的发病特征，同时脾气虚为先，肺气虚为后，符合肺脾气虚证中医证候形成的基本机制；该方法建立肺脾气虚证动物模型，病因病机准确，且无创、稳定、易于评价，拓宽了原造模方法的应用范畴，对陪土生金治法的机制研究奠定基础。

技术领域

本发明涉及实验动物模型技术领域，具体是一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型及其评价方法。

背景技术

“母病及子”是中医理论中的一种不正常的相生现象，表现为母脏遭到破坏后不能正常滋养子脏，导致子脏功能异常的一种病理现象，如脾属土，肺属金，土生金，则脾为母，肺为子；脾虚导致肺虚，最终肺脾气虚则为“母病及子”。

目前对于中医肺脾气虚复合证候模型大多停留在脾气虚症状和肺气虚症状的堆叠而非从证候真正发病机制的角度出发：由脾虚引起的肺虚，肺脾气虚证动物模型造模的主要方法如下：(1)烟熏配合番泻叶法：先采用烟熏法导致大鼠出现肺气虚症状，或应用脂多糖气管滴入导致肺脏受损，后应用番泻叶冷服泻下法建立脾气虚模型；(2)疲劳结合饮食失节加烟熏法：每日使大鼠游泳力竭并单日以白菜喂养双日以猪油脂灌胃建立脾虚模型，之后烟熏建立肺气虚模型；(3)烟熏加脂多糖法配合番泻叶法：分别在建模第1天和第15天向大鼠气管内滴注脂多糖；建模第2～13天和第15～40天将大鼠置于烟熏箱中被动吸烟0.5h，每日2次，每次间隔4h；自建模第20天起，取番泻叶沸水浸泡后，置于4℃预冷制备大鼠肺脾气虚泻下模型；(4)脂多糖加烟熏配合大黄水煎液灌胃法：造模开始的第1天、第14天进行气管切开滴注脂多糖；第2～13天、第15～28天，在自制的有机玻璃箱中持续吸入香烟烟雾每日2次，每次半小时，造模第7天起用大黄水煎液灌胃，共8天。

这些造模法，虽然也可以产生肺脾气虚症状，但脾气虚和肺气虚分别造模的方法导致的脏器损伤是相对孤立的，并无病机上的延续性和相关性；同时烟熏和脂蛋白气管滴入本来属于邪气外侵，早期多属于实证，即便延长造模时间，也是因实致虚，最终表现为虚实夹杂，且脂蛋白滴入法本身存在有创手术，动物的创伤导致其造模的不确定性和复杂性，对于研究中药方剂补法中的陪土生金治法并不准确对应病因病机。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型及其评价方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型，该模型实现方法包括以下步骤：

S1、选材分组：取若干只SPF级Wistar大鼠，其中雌雄各半，将大鼠饲养于IVC独立送回风净化笼中，适应性饲养3天，观察大鼠状况良好、无异常后，运用大鼠尾部自动标号仪进行编号并称重，然后按照大鼠体重因素，应用Excel生成随机数字的方法进行分组，分为空白组和模型组；

S2、模型复制：从实验第4d开始，给空白组投食AIN-76A纯化饲料，模型组投食高脂低蛋白饲料，两组均自由饮水进食，模型组从第4d开始，每日下午尾部以30％体重负重，放于自制泳池中游泳，使大鼠不能触及圆筒底部，以大鼠入水到游至力竭即鼻尖没入水中10s时停止；造模时间为6周，实验开始后第14d即进行一般状况指标的观察，实验第45d 开始进行造模情况评估；

S3、模型评价：对肺脾气虚证动物模型进行评价，并建立一般状况评价标准；

S4、指标检测：检测大鼠的各项指标，包括一般状况观察、体重、旷场实验、代谢笼、尿D木糖、肺功能、血清学指标；