[发明专利]多发性骨髓瘤耗竭性NK细胞亚群、其特征基因及其应用

说明书

本发明涉及肿瘤分子生物学领域，具体是多发性骨髓瘤耗竭性NK细胞亚群、其特征基因及其应用。本发明利用单细胞转录组测序分析技术，对多发性骨髓瘤患者与健康人外周血、骨髓来源的NK细胞进行单细胞转录组测序，鉴定出一群多发性骨髓瘤特异性NK细胞亚群，即耗竭性NK细胞亚群，并确定了耗竭性NK细胞表达的特征基因ZNF683，所述特征基因能够用于识别或鉴定来自多发性骨髓瘤的耗竭性NK细胞，进一步用于多发性骨髓瘤的辅助诊断、预后判断及免疫治疗，以及提供相关的检测试剂。

技术领域

本发明涉及肿瘤分子生物学领域，具体地说，是多发性骨髓瘤耗竭性NK细胞亚群、其特征基因及其应用。

背景技术

多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是血液系统恶性增殖性疾病，以骨髓中恶性浆细胞异常增殖为特征，临床表现为贫血、高钙血症、肾功能不全、骨破坏等，因该病致残致死率较高，且目前仍无法治愈，严重影响患者的生存质量和社会经济效益。

NK细胞在MM肿瘤免疫监视方面起着重要作用，与T淋巴细胞不同，NK细胞不受MHC限制，无需经抗原提前致敏即可发挥杀伤作用。在肿瘤微环境中，NK细胞能够迅速对外来的“不良信号”做出反应，这对于肿瘤免疫监视极为重要。然而，肿瘤细胞也可以反向“改造”NK细胞，改变其杀伤功能，使得NK呈现“耗竭”状态，最终逃避NK细胞的“捕杀”，引起疾病迁延。

迄今为止，NK细胞在肿瘤微环境中耗竭的机制及其中涉及的关键分子目前尚不清楚。

发明内容

本发明的目的在于提供多发性骨髓瘤耗竭性NK细胞亚群、其特征基因及其应用。

本发明在前期的研究中发现在多发性骨髓瘤(MM)患者体内存在一群耗竭性NK细胞亚群，且伴随ZNF683基因高表达，并证实该基因编码的转录因子可直接与NK细胞内传递激活信号的接头蛋白EAT-2的启动子区域结合，从而抑制NK细胞的杀伤功能。抑制该转录因子表达后MM患者体内NK细胞的杀伤功能增强。因此ZNF683是NK细胞耗竭的关键分子之一，在制备用于多发性骨髓瘤的辅助诊断、预后判断、免疫治疗的药物方面具有关键作用。

本发明的第一方面，提供一种用于识别或鉴定耗竭性NK细胞的生物标志物，所述的生物标志物为ZNF683基因、其编码表达的蛋白或蛋白片段。

本发明的第二方面，提供ZNF683基因、其编码表达的蛋白或蛋白片段在制备识别或鉴定耗竭性NK细胞的试剂或试剂盒中的应用。

本发明的第三方面，提供一种识别或鉴定耗竭性NK细胞的试剂或试剂盒，所述的检测试剂或试剂盒包含能与ZNF683基因或其编码表达的蛋白或蛋白片段相结合的结合剂。

进一步地，所述的结合剂包括核酸、配体、酶、底物，和/或抗体。

进一步地，所述的结合剂是能ZNF683基因特异性结合的核酸探针或配体。

进一步地，所述的结合剂是能特异性扩增ZNF683基因的引物。

进一步地，所述的结合剂是能与ZNF683基因编码表达的蛋白或蛋白片段特异性结合的抗体。

进一步地，所述的结合剂能进一步结合指示分子，所述指示分子包括：荧光物质、放射性物质、和/或酶。

本发明的第四方面，提供检测ZNF683基因或其编码表达的蛋白或蛋白片段的试剂在制备识别或鉴定耗竭性NK细胞的试剂盒中的应用。

本发明的第五方面，提供检测ZNF683基因或其编码表达的蛋白或蛋白片段的试剂在制备肿瘤辅助诊断、预后判断试剂盒中的应用。

进一步地，所述的肿瘤为多发性骨髓瘤。

本发明的第六方面，提供抑制ZNF683基因或其蛋白表达的试剂在制备肿瘤免疫治疗药物中的应用。