[发明专利]金黄色葡萄球菌TRAP靶向重组蛋白抗原及其用途

说明书

本发明涉及一种靶向树突细胞DEC205受体的金黄色葡萄球菌TRAP重组蛋白抗原，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还涉及一种靶向提呈细胞FC受体的金黄色葡萄球菌TRAP重组蛋白抗原，其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明将TRAP蛋白和靶向抗原提呈细胞的受体肽段重组在一起，不仅增强了小鼠机体的体液免疫应答水平，更显著增强了小鼠的细胞免疫应答水平，这有利于解决金黄色葡萄球菌在胞内感染寄生的问题；该方法不仅显著降低了疫苗的免疫计量，提高了疫苗的利用效率，而且其免疫保护率上升至90％，显著高于未靶向的TRAP蛋白，这有利于降低免疫成本，加快预防奶牛乳房炎的疫苗普及。

技术领域

本发明属于生物医学领域，涉及重组蛋白，特别涉及能够增强细胞免疫应答和抗感染作用的靶向重组蛋白。

背景技术

研究证明S.aureus既能在胞外生存，还能侵染细胞，在巨噬细胞内存活，要想预防既需要良好的体液免疫应答，同时也需要强烈的细胞免疫应答。研究证明利用配体的靶向性能连接的抗原不仅能增强体内的体液免疫应答水平，还能显著增强细胞免疫应答水平。

TRAP蛋白在所有的S.aureus中都表达，目前除了在S.aureus外没有发现TRAP的同源蛋白且TRAP蛋白具有良好的免疫原性，因此TRAP可以作为一种通用的抗葡萄球菌疫苗表位。树突细胞是唯一能够通过MHC分子诱导长效T细胞反应的抗原提呈细胞，且能激活Th2诱导的胸腺依赖性记忆性B细胞免疫反应。DEC205为树突细胞表面的C型凝集素受体，具有高效的靶向性。F c受体介在抗原递呈细胞表面的导抗原加工提呈和细胞因子分泌。因此，可以考虑将受体的靶向肽与TRAP蛋白重组，提高TRAP蛋白的靶向性，以此提高TRAP蛋白的免疫水平。

发明内容

本发明的第一目的是提供靶向树突细胞DEC205受体的金黄色葡萄球菌TRAP重组蛋白抗原，克服目前TRAP蛋白靶向性能不够，免疫水平不高的问题。

本发明的第二目的是提供上述重组蛋白抗原的用途。

本发明的第三目的是提供靶向提呈细胞FC受体的金黄色葡萄球菌TRAP重组蛋白抗原，克服目前TRAP蛋白靶向性能不够，免疫水平不高的问题。

本发明的第四目的是提供上述重组蛋白抗原的用途。

本发明通过以下技术方案来实现：

一、一种靶向树突细胞DEC205受体的金黄色葡萄球菌TRAP重组蛋白抗原，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

进一步的，上述的重组蛋白抗原，是由TRAP蛋白与具有靶向性的scFvDEC205基因片段通过一段柔性蛋白(G₄S)₃连接在一起制备而成的。

二、上述的重组蛋白抗原在制备抗金黄色葡萄球菌感染的疫苗中的应用。

三、一种靶向提呈细胞FC受体的金黄色葡萄球菌TRAP重组蛋白抗原，其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示

进一步的，上述的重组蛋白抗原，是由TRAP蛋白与具有靶向性的Fc基因片段通过一段柔性蛋白(G₄S)₃连接在一起制备而成的。

四、上述的重组蛋白抗原在制备抗金黄色葡萄球菌感染的疫苗中的应用。

采用上述技术方案的积极效果：本发明将TRAP蛋白和靶向抗原提呈细胞受体的肽段重组在一起，不仅增强了小鼠机体的体液免疫应答水平，更显著增强了小鼠的细胞免疫应答水平，这有利于解决金黄色葡萄球菌在胞内感染寄生的问题；该方法不仅显著降低了疫苗的免疫剂量，提高了疫苗的利用效率，而且其免疫保护率上升至90％，显著高于未靶向的TRAP蛋白，这有利于降低免疫成本，加快预防奶牛乳房炎的疫苗普及。

附图说明

图1是重组蛋白表达载体质粒示意图；