[发明专利]用于基因组编辑的新颖的非天然存在的CRISPR-CAS核酸酶

权利要求书

1.一种编码RNA引导的DNA核酸内切酶的核酸分子，其是

(a)编码包含SEQ ID NO:29、1或3的氨基酸序列或由SEQ ID NO:29、1或3的氨基酸序列组成的RNA引导的DNA核酸内切酶的核酸分子；

(b)包含SEQ ID NO:30、2或4的核苷酸序列或由SEQ ID NO:30、2或4的核苷酸序列组成的核酸分子；

(c)编码氨基酸序列与(a)的氨基酸序列至少93％且最优选至少95％相同的RNA引导的DNA核酸内切酶的核酸分子；

(d)包含与(b)的核苷酸序列至少93％且最优选至少95％相同的核苷酸序列或由与(b)的核苷酸序列至少93％且最优选至少95％相同的核苷酸序列组成的核酸分子；

(e)相对于(d)的核酸分子简并的核酸分子；或

(f)对应于(a)至(d)中任一项的核酸分子的核酸分子，其中T被U替代。

2.权利要求1所述的核酸分子，其中所述核酸分子可操作地连接至对于所述核酸分子是天然的或异源的启动子。

3.权利要求1或2所述的核酸分子，其中所述核酸分子针对真核细胞中、优选植物细胞或动物细胞中的表达进行了密码子优化。

4.一种载体，其编码权利要求1至3中任一项所述的核酸分子。

5.一种宿主细胞，其包含权利要求1至3中任一项所述的核酸分子或转化、转导或转染有权利要求4所述的载体。

6.权利要求5所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是真核细胞或原核细胞，优选是植物细胞或动物细胞。

7.一种植物、种子或植物的一部分、或者动物，其包含权利要求1至3中任一项所述的核酸分子或转化、转导或转染有权利要求4所述的载体，所述植物的一部分不是单个植物细胞。

8.一种产生RNA引导的DNA核酸内切酶的方法，其包含培养权利要求5或6所述的宿主细胞并分离所产生的RNA引导的DNA核酸内切酶。

9.一种RNA引导的DNA核酸内切酶，其由权利要求1至3中任一项所述的核酸分子编码。

10.一种组合物，其包含权利要求1至3中任一项所述的核酸分子，权利要求4所述的载体，权利要求5或6所述的宿主细胞，权利要求7所述的植物、种子、细胞的一部分或动物，权利要求9所述的RNA引导的DNA核酸内切酶或它们的组合。

11.权利要求10所述的组合物，其中所述组合物是药物组合物或诊断组合物。

12.权利要求1至3中任一项所述的核酸分子，权利要求4所述的载体，权利要求5或6所述的宿主细胞，权利要求7所述的植物、种子、细胞的一部分或动物，权利要求9所述的RNA引导的DNA核酸内切酶或它们的组合，其用于通过修饰受试者或植物的基因组中靶位点的核苷酸序列而治疗所述受试者或植物的疾病的用途。

13.一种修饰细胞的基因组中靶位点的核苷酸序列的方法，包括将如下引入所述细胞：

(i)靶向DNA的RNA或编码靶向DNA的RNA的DNA多核苷酸，其中所述靶向DNA的RNA包含：

(a)包含与靶DNA中的序列互补的核苷酸序列的第一片段；和

(b)与权利要求9所述的RNA引导的DNA核酸内切酶相互作用的第二片段；和

(ii)权利要求9所述的RNA引导的DNA核酸内切酶，或权利要求1至3中任一项所述的编码RNA引导的DNA核酸内切酶的核酸分子，或权利要求4所述的载体，其中所述RNA引导的DNA核酸内切酶包含：

(a)与所述靶向DNA的RNA相互作用的RNA结合部分；和

(b)表现出定点酶活性的活性部分。