[发明专利]通过细胞培养或微生物发酵产生的寡糖溶液的纯化方法

权利要求书

1.一种以批次方式或连续方式从细胞培养或微生物发酵获得的培养或发酵液中纯化寡糖溶液的方法，该培养或发酵液还包括生物量、培养基成分及污染物，其中该培养或发酵液中的寡糖溶液的纯度较佳地占总干燥固体的80％，并且该培养或发酵液应用于以下纯化步骤：

i)澄清该培养或发酵液。

ii)从该澄清的培养或发酵液中去除盐及/或培养基成分，以及

iii)较佳为浓缩该寡糖溶液，

其中，提供占总干燥固体≥80％的纯度的纯化寡糖溶液，

其特征在于，从该澄清的培养液或发酵液中去除盐分及/或培养基成分的步骤ii)包括由用于去除正电材料的阳离子交换处理所组成的离子交换处理，并且不包括用于去除负电材料的阴离子交换处理。

2.如权利要求1所述的方法，其中步骤iii)在步骤ii)之前进行。

3.如权利要求1或2中任一项所述的方法，其中该纯化寡糖溶液具有占总干燥固体≤10％的灰分含量，较佳为占总干燥固体的≤9％、更佳为占总干燥固体的≤8％、更佳为占总干燥固体的≤7％、更佳为占总干燥固体的≤6％、更佳为占总干燥固体的≤5％、更佳为占总干燥固体的≤4％、更佳为占总干燥固体的≤3％、更佳为占总干燥固体的≤2％、更佳为占总干燥固体的≤1％、更佳为占总干燥固体的≤0.5％。

4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中该寡糖溶液从由细胞培养获得的培养或发酵液中纯化，该细胞培养使用至少一种细胞，较佳为在化学限定培养基中生长的重组细胞，其中在步骤i)中分离的生物量可视需要地回收至该培养中。

5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中该寡糖溶液从由微生物发酵获得的发酵液中纯化，该微生物发酵使用至少一种微生物，较佳为细菌或酵母，更佳为在化学限定培养基中生长的重组微生物，其中在步骤i)中分离的生物量可视需要地回收至该微生物发酵中。

6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中该细胞培养使用重组细胞，并包括至少一种细胞，其经基因改造以产生寡糖，较佳为该至少一种细胞已被基因改造以产生至少两种不同寡糖。

7.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中该细胞培养为使用重组微生物的微生物发酵，并包括至少一种微生物，其经基因改造以产生寡糖，较佳为该至少一种微生物已被经基因改造以产生至少两种不同寡糖。

8.如权利要求1至7中任一项所述的方法，其中该培养或发酵液中的该寡糖溶液是由使用至少一种基因改造细胞的细胞培养或微生物发酵获得的，该至少一种基因改造细胞能够产生该寡糖溶液，较佳为来自内化的碳水化合物前体。

9.如权利要求1至8所述的方法，其中该细胞培养或微生物发酵在具有碳源的基础盐培养基中培养，该至少一种细胞或微生物在其上生长。

10.如权利要求9所述的方法，其中该基础盐培养基含有硫酸盐、磷酸盐、氯化物、铵、钙离子、镁离子、钠离子、钾离子、铁离子、铜离子、锌离子、锰离子、钴离子及/或硒离子。

11.如权利要求9或10中任一项所述的方法，其中该碳源包括葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖、麦芽糖、玉米浸液、乳糖、半乳糖、高果糖浆、淀粉、纤维素、半纤维素、麦芽寡糖、海藻糖、甘油、醋酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐和丙酮酸盐中的一种或多种。

12.如权利要求1至11中任一项所述的方法，其中纯化前在该培养或发酵液中的该寡糖溶液的纯度为占总干燥固体的70％、60％、50％、40％、30％、20％、10％，及/或纯化后的该寡糖溶液的纯度为占总干燥固体的80％、较佳为85％、更佳为90％、甚至更佳为95％、最佳为97％。

13.如权利要求1至12中任一项所述的方法，其中该寡糖溶液的纯化产率为＞60％，较佳为＞65％，更佳为＞70％，最佳为＞75％。