[发明专利]软骨组织体的制造方法在审
申请号: | 202180046853.7 | 申请日: | 2021-07-01 |
公开(公告)号: | CN115997007A | 公开(公告)日: | 2023-04-21 |
发明(设计)人: | 宝田刚志;岩井良辅;铃木康平;深泽菜月 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人冈山大学;学校法人加计学园;日产化学株式会社 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 焦成美 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 软骨 组织 制造 方法 | ||
1.软骨组织体的制造方法,其特征在于,包括下述工序:
提供细胞凝集块制造用基板的工序,所述细胞凝集块制造用基板在具有抑制细胞附着的能力的基板上具备由包含由下述式(I)表示的单体衍生的重复单元、及由下述式(II)表示的单体衍生的重复单元的共聚物形成的多个点部;在该基板上接种来自多能干细胞的PRRX1蛋白阳性的人软骨祖细胞的工序;对该细胞进行培养从而制成细胞凝集块的工序;对该凝集块进行培养从而制成软骨组织体的工序,
[化学式1]
式(I)中,
Ua1及Ua2各自独立地表示氢原子或碳原子数为1至5的直链或支链烷基,Ra1表示氢原子或碳原子数为1至5的直链或支链烷基,Ra2表示碳原子数为1至5的直链或支链亚烷基;
[化学式2]
式(II)中,
Rb表示氢原子或碳原子数为1至5的直链或支链烷基。
2.如权利要求1所述的制造方法,其中,由式(I)表示的单体衍生的重复单元相对于由所述式(I)表示的单体衍生的重复单元及由所述式(II)表示的单体衍生的重复单元的合计而言的摩尔比率为99摩尔%~51摩尔%。
3.如权利要求1或2所述的制造方法,其中,所述共聚物还包含由下述式(III)表示的单体衍生的结构单元,
[化学式3]
式(III)中,
Rc及Rd各自独立地表示氢原子或碳原子数为1至5的直链或支链烷基,Re表示碳原子数为1至5的直链或支链亚烷基,n表示1~50的数。
4.如权利要求1~3中任一项所述的制造方法,其中,所述具有抑制细胞附着的能力的基板在其表面的至少一部分包含含有共聚物(P)的涂覆膜,所述共聚物(P)包含含有下述式(a)表示的基团的重复单元、和含有下述式(b)表示的基团的重复单元,
[化学式4]
式中,
Ua11、Ua12、Ub11、Ub12及Ub13各自独立地表示氢原子或碳原子数为1至5的直链或支链烷基,An-表示选自由卤化物离子、无机酸根离子、氢氧化物离子及异硫氰酸根离子组成的组中的阴离子。
5.如权利要求1~4中任一项所述的制造方法,其中,制成软骨组织体的工序中的培养是利用含有琼脂的培养基实施的。
6.如权利要求5所述的制造方法,其中,琼脂的重均分子量为10,000~60,000,琼脂的含量相对于培养基的总量而言为0.005(w/v)%以上且小于2(w/v)%。
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