[发明专利]断裂内含肽及其用途

权利要求书

1.一种组合物，包括：

a.第一多核苷酸，所述第一多核苷酸编码包含断裂内含肽N片段的多肽，其中所述断裂内含肽N片段选自由以下组成的清单：通过肽键、可选地通过肽接头与要重构的蛋白质的N端片段直接连接的SEQ ID NO 27的CfaN、SEQ ID NO 30的CatN和SEQ ID NO 38的Gp41N、或其任何功能等效变体如SEQ ID NO 39的ConN；和

b.第二多核苷酸，所述第二多核苷酸编码包含断裂内含肽C片段的多肽，其中所述断裂内含肽C片段选自由以下组成的清单：通过肽键、可选地通过肽接头与所述要重构的蛋白质的C端片段直接连接的SEQ ID NO 28的CfaC、SEQ ID NO 31的CatC和SEQ ID NO 104的Gp41C、或其任何功能等效变体如CfaCmut(SEQ ID NO 29)或ConC(SEQ ID NO 105)；

其中所述组合物的两种多核苷酸可以一起包装在单一制剂中或分别包装在不同制剂中；

其中所述第一多核苷酸和所述第二多核苷酸分别编码所述要重构的蛋白质的所述N端片段和所述C端片段，使得当两个片段组合时，所述蛋白质的所述N端片段与所述蛋白质的所述C端片段连接，从而产生整个蛋白质；

其中所述要重构的蛋白质大于25KDa；以及

其中所述组合物进一步的特征在于：

-所述断裂内含肽N片段进一步通过肽键与降解决定子直接连接，其中所述降解决定子在所述内含肽N片段和所述降解决定子之间有或没有接头的情况下通过所述内含肽的所述C端与所述内含肽N片段连接，并且其中所述断裂内含肽N片段的所述N端通过肽键与所述要重构的蛋白质的所述N端片段直接连接；和/或

-所述断裂内含肽C片段进一步通过肽键与降解决定子直接连接，其中所述降解决定子在所述内含肽C片段和所述降解决定子之间有或没有接头的情况下通过所述内含肽的所述N端与所述内含肽C片段连接，并且其中所述断裂内含肽C片段的所述C端通过肽键与所述要重构的蛋白质的所述C端片段直接连接。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述断裂内含肽N片段是通过肽键、可选地通过肽接头与要重构的蛋白质的N端片段直接连接的SEQ ID NO 27的CfaN，以及所述断裂内含肽C片段是通过肽键、可选地通过肽接头与所述要重构的蛋白质的C端片段直接连接的SEQID NO 28的CfaC。

3.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述断裂内含肽N片段是通过肽键、可选地通过肽接头与要重构的蛋白质的N端片段直接连接的SEQ ID NO 27的CfaN，以及所述断裂内含肽C片段是通过肽键、可选地通过肽接头与所述要重构的蛋白质的C端片段直接连接的SEQID NO 29的CfaCmut。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中，与所述断裂内含肽N片段和/或断裂内含肽C片段直接连接的所述降解决定子选自由以下组成的清单：CL1、Deg1、PEST、DD1、DD2、DD3、M1、M2、SopE、SopE-1-78、SopE-15-78、SopE-15-50、L2、L6、L9、L10、L11、L12、L15、L16、M3、M4、M5、V12、DD4、DD5、DD6和DD7。

5.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中，与所述断裂内含肽N片段和/或断裂内含肽C片段直接连接的所述降解决定子选自由以下组成的清单：DD1、DD3、PEST、SopE、L2、L9、M4或V12。

6.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中，与所述断裂内含肽N片段和/或断裂内含肽C片段直接连接的所述降解决定子选自由以下组成的清单：SopE、L2、L9、M4或V12。