[发明专利]使用蛋白质-精氨酸脱亚胺酶1(PAD1)自身抗原诊断和评估类风湿性关节炎的组合物和方法

权利要求书

1.诊断类风湿性关节炎(RA)的方法，其包括：

(a)使来自怀疑患有RA的受试者的生物样品与至少一种肽基精氨酸脱亚胺酶(PAD)蛋白或其抗原性片段接触，以及

(b)检测与所述至少一种PAD蛋白或其抗原性片段有反应性的自身抗体的存在，其中所述自身抗体的存在指示RA，

其中所述至少一种PAD蛋白包括PAD1，或PAD1和PAD4，并且任选地进一步包括选自PAD2、PAD3和PAD6的一种或多种PAD蛋白或其抗原性片段。

2.权利要求1所述的方法，其中所述至少一种PAD蛋白包括

(a)PAD1或其抗原性片段；

(b)PAD1和PAD4或其抗原性片段；

(c)PAD1、PAD4和PAD2或其抗原性片段；

(d)PAD1、PAD4和PAD3或其抗原性片段；

(e)PAD1、PAD4、PAD2和PAD3或其抗原性片段；或

(f)PAD1、PAD4、PAD2、PAD3和PAD6或其抗原性片段。

3.权利要求1或2所述的方法，其中所述生物样品包括

(a)全血、血清、血浆滑液或痰；或

(b)血清或血浆。

4.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述抗原性片段包括6-120、12-100、18-80、24-60、30-50或35-45个氨基酸残基。

5.权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述PAD蛋白或其抗原性片段通过以下获得

(a)包括从天然来源的分离、化学合成或重组表达的方法；或

(b)包括化学合成的方法。

6.权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述检测包括

(a)免疫测定法，

其中所述免疫测定法任选地选自下组：荧光免疫吸附测定法(FIA)、化学发光免疫测定法(CIA)、放射免疫测定法(RIA)、多重免疫测定法、蛋白质/肽阵列免疫测定法、固相放射免疫测定法(SPRIA)、间接免疫荧光测定法(IIF)、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、基于颗粒的多分析物测试(PMAT)，以及斑点印迹测定法；和/或

(b)使与所述PAD蛋白或其抗原性片段结合的所述自身抗体与检测探针接触，

其中所述检测探针任选地：

(i)与所述自身抗体结合；

(ii)包含抗体或其功能片段；和/或

(iii)包含报告标签，

其中所述报告标签任选地包含标记物，其中所述标记物任选地选自荧光团、酶、化学发光部分、放射性部分、有机染料和小分子，和/或任选地是荧光标记物，并且

其中所述荧光标记物任选地是藻红蛋白(PE)；或

(iv)配体或颗粒，并且其中所述配体任选地包括生物素或纳米颗粒。

7.监测类风湿性关节炎(RA)的进展的方法，其包括：

(a)使来自患有或怀疑患有RA的受试者的生物样品与至少一种肽基精氨酸脱亚胺酶(PAD)蛋白或其抗原性片段接触，以及

(b)检测：

(i)与所述至少一种PAD蛋白或其抗原性片段有反应性的自身抗体的存在，其中所述自身抗体的存在指示疾病进展，和/或

(ii)与所述至少一种PAD蛋白或其抗原性片段结合的自身抗体的缺失，其中所述自身抗体的缺失指示疾病进展，

其中所述至少一种PAD蛋白包括PAD1，或PAD1和PAD4，并任选地进一步包括PAD3或其抗原性片段。

8.权利要求7所述的方法，其中所述至少一种PAD蛋白包括：

(a)PAD1或其抗原性片段；

(b)PAD1和PAD4或其抗原性片段。

9.权利要求7或权利要求8所述的方法，其中所述自身抗体的存在指示RA阶段。