[发明专利]咪唑二肽的精制方法

说明书

本发明的目的在于提供一种不依赖动物性提取物的种类，以高纯度且工业规模地大量生产各种咪唑二肽的方法。上述目的通过包括以下工序(1)以及(2)的咪唑二肽精制物的制造方法来解决：(1)通过将含有至少两种咪唑二肽的动物性提取物处理液供于与疏水性吸附树脂接触的吸附处理，使咪唑二肽吸附到疏水性吸附树脂上的工序；以及，(2)通过将吸附有咪唑二肽的疏水性吸附树脂供于使用水性溶液的溶出处理，将所述至少两种咪唑二肽相互分离并回收，来精制咪唑二肽的工序。

技术领域

本发明涉及咪唑二肽的精制方法。

背景技术

咪唑二肽是具有咪唑基的组氨酸或组氨酸衍生物与氨基酸结合而成的二肽，具体例可以列举出：鹅肌肽(β-丙氨酰-1-甲基组氨酸)、肌肽(β-丙氨酰组氨酸)、鲸肌肽(β-丙氨酰-3-甲基组氨酸)、高肌肽(γ-氨基丁酰基-L-组氨酸)等。已知咪唑二肽具有抗疲劳作用、抗氧化作用、抑制血糖上升作用、改善认知功能作用等生理作用，作为功能性成分而备受关注。

作为咪唑二肽的制造方法，已知有以L-组氨酸以及3-甲基-L-组氨酸等为起始原料，进行化学、酶法或微生物学合成的方法。例如，下述专利文献1(该文献的全部记载在此作为公开被引用。)中，记载了使用具有咪唑二肽合成活性的微生物制造咪唑二肽的方法。但是，专利文献1中记载的方法使用3-甲基-L-组氨酸以及1-甲基-L-组氨酸作为起始原料，从它们的稳定供给的观点来看，需要以工业规模大量地制造咪唑二肽时仍然存在问题。

与此相对，作为以工业规模大量地制造咪唑二肽的方法，有从含有咪唑二肽的金枪鱼、鲣鱼、鲑鱼等鱼类、牛、猪、鲸等哺乳类、鸡等鸟类等动物的提取物中获取的方法。

作为从动物性提取物中制造咪唑二肽的方法，有利用离子交换处理的方法。例如，下述专利文献2(该文献的全部记载在此作为公开被引用。)中，记载了以下方法：将对鱼贝类提取物进行脱盐处理所得到的脱盐处理液通入H型弱酸性阳离子交换树脂中，吸附咪唑二肽，然后水洗后用盐酸和/或盐水溶出咪唑二肽。

下述专利文献3(该文献的全部记载在此作为公开被引用。)中，记载了以下方法：使动物性提取物与强酸性阳离子交换树脂接触而吸附咪唑二肽，该强酸性阳离子交换树脂为使用调节至与动物性提取物相同电导率范围(10±2mS/cm)以及pH范围(5.0±0.5)的缓冲液预先平衡化为H型的强酸性阳离子交换树脂；然后用缓冲液以及纯水洗涤后，通过通入或混合pH8～pH12范围的碱性溶液来溶出咪唑二肽。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2020-22433号公报

专利文献2：日本特许第4612549号

专利文献3：日本特许第5142126号

发明内容

发明要解决的课题

一般地，动物性提取物根据动物的种类以及部位，含有两种以上的咪唑二肽。但是，由于如鹅肌肽、肌肽、鲸肌肽和高肌肽的咪唑二肽具有相似的电学性质，因此专利文献2以及3所记载的利用离子交换处理的方法中，两种以上的咪唑二肽没有被单独分离，而是以动物的提取物的原本具有的成分比例被回收。即，专利文献2以及3中记载的利用离子交换处理的方法存在不能将两种以上的咪唑二肽相互分离的问题。

此外，由于肌肽的分子量为226，高肌肽、鹅肌肽以及鲸肌肽的分子量为240，因此它们的分子量彼此相似，在使用反渗透膜、纳滤(NF)膜等按分子量的膜分级中，存在不能将两种以上的咪唑二肽相互分离的问题。

例如，使用来源于鸡的提取物，通过离子交换处理法得到的咪唑二肽是含有重量比2：1～3：1的鹅肌肽以及肌肽的混合物。在使用来源于鲸的提取物的情况下，得到的咪唑二肽是含有重量比为4：1至5：1的鲸肌肽和肌肽的混合物。而且，迄今为止，从这些混合物中将各种咪唑二肽在工业上相互分离的方法几乎是未知的。