[发明专利]一种增强肝靶向性的重组腺相关病毒及其用途

权利要求书

1.一种重组腺相关病毒(rAAV)，包含：

(a)腺相关病毒(AAV)衣壳蛋白，其具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列

(b)表达盒，其包含多核苷酸序列，其中多核苷酸序列编码可用于治疗肝脏疾病的治疗剂。

2.根据权利要求1所述的rAAV，其中所述多核苷酸序列编码的治疗剂是α半乳糖苷酶A(GLA)或靶向乙型肝炎病毒(HBV)基因组的shRNA。

3.根据权利要求1或2所述的rAAV，其中所述表达盒还包含启动子和/或人的非编码填充序列，其中启动子位于所述多核苷酸序列的上游，人的非编码填充序列位于所述多核苷酸序列的下游。

4.根据权利要求3所述的rAAV，其中所述启动子是RNA聚合酶II启动子或RNA聚合酶III启动子。

5.根据权利要求3或4所述的rAAV，其中所述启动子是LP1启动子、ApoE/hAAT启动子、DC172启动子、DC190启动子、ApoA-I启动子、TBG启动子、LSP1启动子、

7SK启动子、H1启动子、U6启动子或HD-IFN启动子。

6.根据权利要求3-5中任一项所述的rAAV，其中所述启动子：

(i)对于编码GLA的多核苷酸序列，采用的是LP1或DC172启动子，或者

(ii)对于编码shRNA的多核苷酸序列，采用的是H1启动子。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的rAAV，其中所述表达盒还包含AAV反向末端重复序列(ITRs)。

8.根据权利要求7所述的rAAV，其中AAV反向末端重复序列(ITRs)源自AAV的任意血清型，包括分支A-F、AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9或其任何杂合/嵌合类型。

9.根据权利要求7或8所述的rAAV，其中反向末端重复序列ITRs源自AAV2血清型。

10.根据权利要求2-9中任一项所述的rAAV，其中：

(i)GLA包含SEQ ID NO：2所示序列，或

(ii)编码shRNA的多核苷酸序列包含SEQ ID NO：3所示序列。

11.根据权利要求3-10中任一项所述的rAAV，其中所述人的非编码填充序列是人的凝血因子IX的内含子序列、人的粘粒C346的序列、HPRT-内含子序列或其组合。

12.根据权利要求11所述的rAAV，其中所述人的非编码填充序列是包含SEQ ID NO：4所示序列的HPRT-内含子序列。

13.根据权利要求1中任一项所述的rAAV，其中所述表达盒包含SEQ ID NO：5所示序列。

14.根据权利要求1中任一项所述的rAAV，其中所述表达盒包含SEQ ID NO：6或7所示序列。

15.根据权利要求13或14所述的rAAV，其中所述表达盒还包含SEQ ID NO：8所示的序列。

16.一种组合物，其包含权利要求1-15中任一项所述的rAAV。

17.根据权利要求16所述的组合物，其还包含药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂。

18.一种在患者中治疗肝脏疾病的方法，包括向患者施用治疗有效量的权利要求1-15中任一项所述的rAAV或权利要求16或17中所述的组合物。