[发明专利]侧流分析条带和使用该条带的分子诊断方法

说明书

公开了侧流分析条带及使用该条带的分子诊断方法。侧流分析条带可包括：样品垫(100)，包含用标签标记的扩增子和用标签标记的扩增子前体中的至少一种的样品将被引入其中；缀合物垫(200)，所述缀合物垫(200)包含缀合物(C1)，所述缀合物(C1)具有指示剂和结合至指示剂表面的检测剂，并且缀合物(C1)非固定地吸附至所述缀合物垫(200)；测试垫(300)，所述测试垫(300)包含测试线(310)，第一捕获剂固定至所述测试线(310)；对照垫(400)，所述对照垫(400)包含对照线(410)，第二捕获剂固定至所述对照线(410)；以及吸收垫(500)。本发明的侧流分析条带可检测扩增子(例如核酸)并且可直接用肉眼确定结果，所述扩增子使用标记有一种类型的标签的扩增子前体(例如引物或dNTP)进行扩增。此外，通过使用具有强结合力的标签、结合至标签的捕获剂、检测剂和结合至检测剂的捕获剂，侧流分析条带有利地具有高灵敏度。进一步地，通过使用具有一定结合力的标签、结合至标签的捕获剂、检测剂和结合至检测剂的捕获剂，侧流分析条带具有可重现且稳定的效果。

技术领域

本公开涉及侧流测定条带和使用该条带的分子诊断方法。更具体而言，本公开涉及能够检测扩增子并能够进行诊断的侧流测定条带以及使用该侧流测定条带的分子诊断方法，所述扩增子使用标记有一种类型的标签的扩增子前体进行扩增。

背景技术

作为检测和诊断病毒或核酸的常规方法，主要使用血清学方法或使用电子显微镜的方法。虽然使用电子显微镜的方法可确认病毒的存在，但几乎不可能通过其形态特征来识别物种。在血清学方法中，酶联免疫吸附测定(ELISA)最为常见，但它具有比聚合酶链式反应(PCR)诊断方法低约1,000倍的检测灵敏度，并且经常由于预料不到的非特异性反应而无法进行准确诊断。

近来，具有高检测灵敏度和便利性的PCR方法已被用于检测病毒或核酸并进行诊断。然而，基于PCR的诊断的问题在于，它需要开发特定的引物，并且涉及通过电泳和进行DNA测序来确认经扩增的反应产物的一系列步骤。此外，该方法还需要专门的装置(例如聚合酶链式反应设备(热循环仪))和能够操作该设备的专业技术人员。确认最终扩增产物的DNA测序是需要大量资金和高端技术的过程。此外，执行上述一系列步骤需要长的时间，并且不能用肉眼确认诊断结果。因此，存在难以在缺乏特定分析装置的环境中使用该方法的问题。

因此，为了在短时间内有效地检测病毒或基因，需要开发能够在没有配备专门装置的现场实时检测病毒或基因的诊断装置和方法。

发明内容

技术问题

因此，考虑到相关技术中出现的上述问题而做出了本公开，并且本公开的目的是提供能够检测扩增子(例如核酸)并能立即用肉眼确认结果的侧流测定条带，所述扩增子使用标记有一种类型的标签的前体(例如引物或dNTP)进行扩增。

本公开的另一个目的是提供如下的侧流测定条带以及使用该条带的分子诊断方法，所述侧流测定条带具有高灵敏度，并使用至少一个标签、结合至标签的捕获分子、检测剂和结合至检测剂的捕获分子。

本公开的进一步目的是提供可再现且稳定的侧流测定条带以及使用该条带的分子诊断方法，所述侧流测定条带使用具有恒定结合力的至少一个标签、结合至标签的捕获分子、检测剂和结合至检测剂的捕获分子。

技术方案

根据本公开的一方面，侧流测定条带10包括：样品垫100，所述样品垫100被配置为接收包含标记有至少一个标签的扩增子和标记有标签的扩增子前体中的至少一种的样品；缀合物垫200，所述缀合物垫200包含具有指示剂和结合至该指示剂的检测剂的第一缀合物C1，其中第一缀合物C1以可流动的方式附着；测试垫300，所述测试垫300包括固定有第一捕获分子的测试线310；对照垫400，所述对照垫400包括固定有第二捕获分子的对照线410；以及吸收垫500。

此外，检测剂可为与第一捕获分子相同的类型。