[实用新型]一种制备慢病毒的装置

说明书

本实用新型涉及慢病毒制备领域，具体涉及一种制备慢病毒的装置。本实用新型公开了一种制备慢病毒的装置，通过增设装有培养基的储液袋，不需要从细胞工厂泵入培养基，使得转染复合物与培养基混合在储液袋中进行，进一步充分混合，提高了操作效率，并能起到一定的缓存作用。另外，还设置了废液容器，形成一套封闭的混合装置，降低了环境污染的风险。

技术领域

本实用新型涉及慢病毒制备领域，具体涉及一种制备慢病毒的装置。

背景技术

磷酸钙法制备慢病毒，较普遍的方式为在一个容器内，将去离子水、氯化钙、质粒混合后，向内缓慢加入HBS溶液，同时通过磁力搅拌的方式使其混合均匀，形成含磷酸钙-DNA复合物，然后将转染复合物加入细胞工厂中，通过晃动细胞工厂将内部培养基与转染复合物混匀。由于混合转染试剂形成磷酸钙-DNA复合物的过程，是开放的环境(生物安全柜内，容器敞口)，添加质粒等原料的时候，容易引入微生物，存在污染风险。转染复合物需转移进细胞工厂内与培养基混匀，此步有两种方式，一种为将转染混合液直接加入细胞工厂中，通过缓慢晃动细胞工厂，达到转染复合物与培养基混合均匀的目的，因细胞工厂结构特殊，转染复合物与培养基可能存在混合不均匀的情况，造成细胞工厂内每一层转染复合物分布不均，同时，因慢病毒制备使用的生产细胞为HEK293T细胞，贴壁性不强，摇晃混合转染复合物与培养基，可能会导致细胞脱落，影响质粒的转染效率。另一种方式为将转染复合物加入到一个简单的换液装置中，然后将细胞工厂与此装置连通，将细胞工厂内培养基通过蠕动泵泵入装置内与转染复合物混合均匀后再泵回至细胞工厂内。此方式的缺点为转染试剂转移至换液装置的过程也是开放的环境(生物安全柜内)，存在一定的污染风险。

专利CN201822035919.0公开了一种便于批量包装慢病毒的混合器，混合器本体设有两个储液腔体，分别是A液贮液瓶和B液贮液瓶，A液贮液瓶和B液贮液瓶之间设有连通结构，所述的连通结构上设有控制装置，所述的连通结构为软管，A液贮液瓶一侧设有固定装置，B液贮液瓶底部设有振动结构，所述的B液贮液瓶内设有注射针，B液贮液瓶顶部设有进针口，注射针一端连接软管，注射针通过进针口进入B液贮液瓶，注射针另一端为出液口，出液口设置在B液贮液瓶底部，出液口倾斜设置。优点在于不但节约了包装慢病毒时A液与B液混合时操作的劳动强度与时间，而且还适用于批量慢病毒的包装；另有加工简单，可反复使用，成本低廉，便于推广等优点。但是，该混合器只能用于包装慢病毒的A液和B液的混合，并没有提供混合后导入培养容器中的过程；B液贮液瓶没有设置出液口，当A液和B液混合完成后，将混合液转入培养容器中时只能打开盖子，取出混合液，容易造成污染；该混合式设置有两个贮液瓶，人员需要对两个贮液瓶进行观察和处理，同样需要付出较多劳动力；A液贮液瓶上连接加压设备，B液贮液瓶上有排压口，容易造成液体充满B液贮液瓶将液体压出；另外，该混合器也未有收集废弃液的部件，未能形成一套封闭的混合装置，避免造成污染。

专利CN202021193441.5公开了一种用于慢病毒制备的细胞培养容器连通器及混合器，其能简化病毒制备的流程，将转染试剂的合成步骤与转染试剂和培养基混合的步骤简化至在同一个装置内完成的同时降低了污染风险，且能使转染试剂与培养基能更充分的混合。其直接与细胞培养容器连接，未有起到缓冲和暂停作用的中间装置，并且其中的细胞工厂连通器只是采用的单通道接头，采用单通道接头容易导致质粒混合液形成一股速度较快的流量将黏附于细胞工厂壁上的细胞脱落，严重影响细胞的转染成功率，并且该技术中也没有使用废液罐装置，每次需要人工收集废液，并且污染物也容易从废液管中进入整个制备装置中，没有形成完全意义的封闭状态。

实用新型内容

本实用新型为了解决上述问题，提供了一种制备慢病毒的装置，通过增设装有培养基的储液袋，使得转染复合物与培养基混合在储液袋中进行，进一步充分混合，提高了操作效率，并能起到一定的缓存作用；另外，本实用新型装置还设置了废液容器，形成一套封闭的混合装置，降低了环境污染的风险；并且该装置中的细胞工厂连通器采用了一分多转接头，极大的提高了细胞的转染率。

本实用新型目的在于提供一种制备慢病毒的装置，各部件可拆卸组装，方便慢病毒的培养制备，具体技术方案如下：