[实用新型]一种简易式核酸提取装置

说明书

本实用新型公开了一种简易式核酸提取装置。本实用新型装置包括磁棒架、磁棒套架和深孔板；磁棒架包括第一磁棒架；第一磁棒架包括第一磁棒座和固定于第一磁棒座的多个磁棒；磁棒套架包括第一磁棒套架；第一磁棒套架包括第一磁棒套座和固定于第一磁棒套座的多个磁棒套；固定于第一磁棒套座的磁棒套与固定于第一磁棒座的磁棒配合；深孔板包括第一提取区；第一提取区依次包括第一裂解液区、第一洗涤液区、第一洗涤液干燥区和第一核酸扩增试剂区，且每个区域的深孔均与固定于第一磁棒套座的磁棒套配合。本实用新型磁棒式核酸提取装置可解决移液式磁珠提取法存在通量较小，操作繁琐，耗时较长等缺点，减少人工提取核酸的压力。

技术领域

本实用新型涉及一种核酸提取装置，尤其涉及一种简易式核酸提取装置，属于生物医药领域。

背景技术

在传染病防控时期，及时找出感染源头和感染人群是重中之重，使用高效灵敏的检测方法是预防及切断疫情传播最重要的环节，早期使用抗原抗体的检测方法，但因为此方法存在检测窗口期，使得这种检测方法只能作为一种辅助手段。核酸检测就很好的克服了因病毒载量远低于抗原抗体检测方法的灵敏度而检测不到病毒的缺点，现在已成为病毒检测的主要手段。作为分子诊断的一个重要环节，纯化的核酸质量的优劣影响着下游检测的阳性检出率。

核酸检测主要流程包括：样本的采集，核酸的提取，核酸的扩增与分析检测。其中核酸提取步骤主要包括：病毒的灭活裂解，核酸特异性吸附在载体上，将纯化后的核酸洗脱下来与扩增反应试剂混合反应。裂解液中一般含有强蛋白变性剂，既可以促使细胞的破裂，使核酸从细胞中释放出来，也可抑制核酸酶的活性，降低了核酸的降解。而已有研究方法中的固相载体吸附法有：旋转离心柱提取法、玻璃珠吸附法、二氧化硅基质法、阴离子交换法和纳米磁珠提取法，其中，磁珠相较于其他固相载体而言，有易修饰，比表面积高，核酸吸附量高等特点。利用载体对核酸有较强的亲和力和吸附力，特异性与核酸进行结合，而细胞中其他物质仍游离在液相之中，通过移除液相达到核酸富集纯化的作用，之后会将固相载体进行洗涤，除去固相载体表面上的杂质，洗涤液多采用乙醇稀释液，因乙醇对后续分子诊断中的核酸扩增体系有很大的抑制效果，遂在核酸提取时需静置让其挥发。直接将固相载体加入到核酸扩增体系中在一定程度上会抑制反应的发生，所以需使用洗脱液将核酸从固相载体上洗脱下来，再将洗脱液加入到核酸扩增溶液中混匀进行扩增反应及检测。目前核酸检测的金标准是qPCR，即荧光定量PCR，其利用荧光探针或者核酸染料与靶标DNA进行结合，释放光学信号，被光学检测元件收集分析。当存在靶标核酸时，引物与标靶特异性结合，触发反应，将核酸进行数量级式扩增，信号也被数量级式放大，极大增加了核酸检测的灵敏度。

市面上有相当多成熟的试剂盒采用离心柱法，其主要优势是价格低廉且操作便捷，但随着样本量的增加，逐渐暴露其方法的劣势点，步骤繁多，耗时长，且对于样本提取的需求量大，且提取过程中损失多，对珍稀样本的不友好也造成了离心柱法的瓶颈。使用离心柱法提取DNA时频繁需要使用高速离心机反复离心，也限制了其方法的应用场景。现代分子生物学主要有三个变化趋势，一是高通量化，二是高灵敏度化，三是自动化。很显然，离心柱法的发展跟不上现代生物学发展。

于是，20世纪九十年代磁珠法的诞生成了时代发展之主流，通过在磁珠表面修饰基团，使核酸在特定的条件下与磁珠特异性结合，利用磁珠的超顺磁性，在外加磁场作用下使磁珠进行定向移动与富集，进而实现对核酸的分离纯化。核酸处理样本量未达到一定量时使用自动化设备进行处理会造成试剂的浪费和成本的增加，而且市面上自动核酸提取仪非常昂贵，仪器占地比较大，耗材也不便宜，所以人工提取核酸有它应用的场景和存在的必要。

目前使用人工进行核酸提取大部分采用移液式磁珠提取法，利用移液枪和磁力架实现溶液的移取和磁珠的转移，但是频繁使用移液枪也造成了人工提取核酸的通量不高，效率低下，例如，对一些操作不熟悉的人员来说，很容易发生在处理平行样本时最后几个离心管还没将洗涤液移除，最先处理完样本的乙醇已经干燥完了，磁珠长时间暴露在空气当中会造成核酸的降解。核酸处理量的增加还会造成核酸提取时产生人为误差。

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