[发明专利]一种用于术中快速冰冻免疫组化的质控品的制备方法、配套试剂、快速冰冻免疫组化方法

说明书

本发明涉及一种用于术中快速冰冻免疫组化的质控品的制备方法、配套试剂、快速冰冻免疫组化方法，属于病理检测技术领域。该制备方法包括以下步骤：①使用保存液保存含有特定抗原表达的阳性细胞系，得到含有阳性细胞系的保存液；所述保存液由KCl、NaH₂PO₄、Na₂HPO₄、低分子醇、多羟基组分和水组成；②将步骤①得到的所述含有阳性细胞系的保存液滴加在玻片上，晾至半干；③向步骤②中玻片上的阳性细胞系位置滴加固定液固定，去除固定液，干燥；所述固定液由福尔马林、二甲基亚砜和水组成。本发明的用于术中快速冰冻免疫组化的质控品的制备方法，制成的质控品在使用前无需进行抗原修复，操作简便，并且产品稳定性好。

技术领域

本发明属于病理检测技术领域，具体涉及一种用于术中快速冰冻免疫组化的质控品的制备方法、配套试剂、快速冰冻免疫组化方法。

背景技术

目前术中活检的主要方法是术中冰冻切片HE染色，冰冻切片也叫术中快速冰冻切片，其优点是检查快速，病理工作者将医生术中切除的病变组织在冰冻切片机中迅速冷冻后制成组织切片，经过快速苏木素伊红染色，由病理专家即时在显微镜下观察，短时间做出判断，整个过程一般需要在半小时内完成。但由于HE染色判断仅依赖于形态学证据，组织在冰冻过程中不可避免地形成结晶，细胞形态表现质量较差，造成细胞变形，产生人为假象，加上冰冻切片取材有限，更增加了诊断难度，存在漏诊、误诊的可能。

术中冰冻免疫组化诊断可以很好的弥补术中HE染色仅靠形态学判断的弊端，对于一些从形态学难以判断良恶性的疾病，可在短时间内通过免疫组化染色标记特定抗原，增加免疫学证据，根据免疫结果进行诊断，填补术中HE染色难以确诊的缺陷，提高诊断的准确率、帮助发现微小病灶，降低假阴性率。由于使用目的的特殊性，其结果的准确性尤为重要。冰冻免疫组化作为新兴检测手段，其质控体系尚处于探索阶段。在体系不健全的情况下，其阳性对照就显得尤为重要。

市面上有限的质控品主要为石蜡包埋组织蜡块和细胞系蜡块，该质控品主要针对常规免疫组化，在使用前均需进行抗原修复，操作繁琐、使用不便，且售价较高，不适用于术中冰冻免疫组化的质控。冰冻免疫组化用于术中病人的病理诊断，由于其使用的不可预知性，需预处理的质控品不适用于术中免疫组化的质控。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于术中快速冰冻免疫组化的质控品的制备方法，制成的质控品在使用前无需进行抗原修复，操作简便；产品稳定性好。

本发明的第二个目的在于提供一种用于术中快速冰冻免疫组化的质控品的配套试剂。

本发明的第三个目的在于提供一种术中快速冰冻免疫组化方法。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案为：

一种用于术中快速冰冻免疫组化的质控品的制备方法，包括以下步骤：

(1)使用保存液保存含有特定抗原表达的阳性细胞系，得到含有阳性细胞系的保存液；所述保存液由以下组分组成：0.5wt％～3wt％KCl、0.5wt％～3wt％NaH₂PO₄、0.1wt％～2wt％Na₂HPO₄、15vol％～35vol％低分子醇、2wt％～6wt％多羟基组分，溶剂为水；所述低分子醇中的羟基官能团不大于2个，所述多羟基组分中羟基官能团数在3个以上；

(2)将步骤(1)得到的所述含有阳性细胞系的保存液滴加在玻片上，晾至半干；

(3)向步骤(2)中玻片上的阳性细胞系位置滴加固定液固定，去除固定液，干燥；所述固定液由以下体积分数的组分组成：5％～15％福尔马林、15％～25％二甲基亚砜，余量为水。