[发明专利]一种外周血淋巴细胞分离液及其应用

说明书

本发明公开了一种外周血淋巴细胞分离液及其应用。该外周血淋巴细胞分离液以质量计算，含有102.8～110份泛影酸钠、10～30份羟乙基淀粉、30～45份聚蔗糖和2.5～20份聚丙烯吡咯烷酮。采用泛影酸钠代替昂贵的泛影葡胺的同时，引入其他糖类或非糖类高分子，改善小鼠外周血淋溶菌酶巴分离过程中分离效果不佳或者不稳定的现象。可以在长时间内维持分离液和血液间的稳定性，可防止加样时间过长或力度过大，出现的血液和分离液互混的问题，减少血液和分离液互溶现象。且回收效率高、纯度高和活率高，血小板污染少。

技术领域

本发明涉及淋巴细胞分离技术领域，具体地，涉及一种外周血淋巴细胞分离液及其应用。

背景技术

外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte)简称PBL，是白细胞的一种，由淋巴器官产生，参与特异性免疫反应，在免疫应答机制中起重要作用。检测具有免疫应答的外周血淋巴细胞及其组成的数量或比例、功能和强度，是判断人体细胞免疫水平的重要手段。

目前外周血淋巴细胞分离主要是利用血液中各类细胞本身密度差异，利用一定密度的分离液，经过离心，使各类细胞分离开来。传统的分离液以聚蔗糖和泛影葡胺组合的混合物进行外周血淋巴细胞分离。但是泛影葡胺价格昂贵。此外，小鼠是生物学和医学研究领域常用的实验动物，但是小鼠外周血含量较少，且取血过程中极容易导致溶血现象的发生，导致外周血淋巴细胞分离的效果不佳且不稳定。同时也容易产生血小板污染现象。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有外周血淋巴细胞分离液技术的不足，提供了一种外周血淋巴细胞分离液。该外周血淋巴细胞分离液以质量计算，含有102.8～110份泛影酸钠、10～30份羟乙基淀粉、30～45份聚蔗糖和2.5～20份聚丙烯吡咯烷酮。采用泛影酸钠代替昂贵的泛影葡胺的同时，引入其他糖类或非糖类高分子，改善小鼠外周血淋溶菌酶巴分离过程中分离效果不佳或者不稳定的现象。

本发明的第一个目的是提供一种组合物。

本发明的第二个目的是提供所述组合物在制备外周血淋巴细胞分离液中的应用。

本发明的第三个目的是提供一种外周血淋巴细胞分离液。

本发明的第四个目的是提供所述外周血淋巴细胞分离液在制备分离外周血淋巴细胞产品中的应用。

本发明的第五个目的是提供一种分离外周血淋巴细胞的试剂盒。

本发明的第六个目的是提供一种分离外周血淋巴细胞的方法。

为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的：

一种组合物，以质量计算，所述组合物中含有102.8～110份泛影酸钠、10～30份羟乙基淀粉、30～45份聚蔗糖和2.5～20份聚丙烯吡咯烷酮。

优选地，以质量计算，所述组合物中含有106.8～110份泛影酸钠、10～30份羟乙基淀粉、30～45份聚蔗糖和5～10份聚丙烯吡咯烷酮。

更优选地，以质量计算，所述组合物中含有108.5～110份泛影酸钠、10～30份羟乙基淀粉、30～45份聚蔗糖和5～10份聚丙烯吡咯烷酮。

最优选地，以质量计算，所述组合物中含有108.5份泛影酸钠、30份羟乙基淀粉、30份聚蔗糖和5份聚丙烯吡咯烷酮，所述组合物密度为1.082～1.084g/mL，pH为7.2～7.6。

所述的组合物在制备外周血淋巴细胞分离液中的应用。

一种外周血淋巴细胞分离液，所述外周血淋巴细胞分离液含有泛影酸钠、羟乙基淀粉、聚蔗糖和聚丙烯吡咯烷酮。

优选地，所述外周血淋巴细胞分离液含有任一所述的组合物。

所述的外周血淋巴细胞分离液在制备分离外周血淋巴细胞产品中的应用。