[发明专利]控制植物赤霉素合成和株型的基因突变位点检测引物和检测方法及应用有效
| 申请号: | 202111666507.7 | 申请日: | 2021-12-31 |
| 公开(公告)号: | CN114182044B | 公开(公告)日: | 2023-09-08 |
| 发明(设计)人: | 凌宏清;刘毅 | 申请(专利权)人: | 中国科学院遗传与发育生物学研究所;江西省中国科学院庐山植物园 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11;A01H1/04 |
| 代理公司: | 天津耀达律师事务所 12223 | 代理人: | 侯力 |
| 地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 控制 植物 赤霉素 合成 株型 基因突变 检测 引物 方法 应用 | ||
1.用于检测植物基因组中是否存在控制植物赤霉素合成和株型的基因突变位点的引物对,其特征在于正向引物为LP:ACwGCwTdyGCdyTbATGCA,反向引物为RP:CGnGGyArGCTnGCrTACCT。
2.根据权利要求1所述的用于检测植物基因组中是否存在控制植物赤霉素合成和株型的基因突变位点的引物对,其特征在于所述突变位点位于植物CPS基因的第2768位核苷酸,从鸟嘌呤(G)突变为腺嘌呤(A),导致CPS蛋白Terpene synth结构域中的第326位缬氨酸(V)突变成蛋氨酸(M);所述突变位点与植物的赤霉素合成量及株型显著相关,所述位点突变会导致植物体内赤霉素含量低,株型矮化、丛生。
3.权利要求2所述引物对在检测控制植物赤霉素合成和株型的基因突变位点中的应用;所述突变位点直接影响植物的赤霉素合成量及株型,该位点具有AA基因型的植株体内赤霉素含量及株高显著低于具有GG基因型的植株。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于检测植物基因组中是否存在控制植物赤霉素合成和株型的基因突变位点的方法包括:以待测植物基因组DNA为模板,用权利要求1中所述引物对进行PCR扩增,利用所述正向引物LP对扩增产物进行测序分型;扩增产物的序列峰图中只有单峰A的为AA型,表明该植株存在所述的基因突变位点,该植物样品赤霉素合成量低,株型矮;只有单峰G的为GG型,表明该植株不存在所述的基因突变位点,该植物样品赤霉素合成量高,株型高。
5.权利要求2所述的控制植物赤霉素合成和株型的基因突变位点的引物对在植物赤霉素合成量调节及株型创建的辅助选择育种和定点编辑的应用;所述突变位点直接影响植物的赤霉素合成量及株型,该位点被定点编辑成AA基因型的植株体内赤霉素含量及株高显著低于野生型GG基因型的植株;通过权利要求1所述的引物对进行PCR扩增,测序鉴定,可对所述的基因突变位点的杂交选育后代进行辅助选择;所述突变位点位于植物CPS基因的第2768位核苷酸,从鸟嘌呤(G)突变为腺嘌呤(A),导致CPS蛋白Terpene synth结构域中的第326位缬氨酸(V)突变成蛋氨酸(M);所述突变位点与植物的赤霉素合成量及株型显著相关,所述位点突变会导致植物体内赤霉素含量低,株型矮化、丛生。
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