[发明专利]一种类蛇毒三肽的合成方法

权利要求书

1.一种类蛇毒三肽的合成方法，其特征在于，该方法以3-邻苯二甲酰亚胺基丙酸为起始原料，然后进行酰氯化，再与脯氨酸缩合，得到的片段与侧链邻苯二甲酰保护的L-2,4-二氨基丁酰苄胺盐酸盐进行缩合，制得的邻苯二甲酰保护的类蛇毒三肽，最后通过肼解脱掉邻苯二甲酰保护基后得到游离的类蛇毒三肽。

2.根据权利要求1所述的类蛇毒三肽的合成方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤：

(1)3-邻苯二甲酰亚胺基丙酸为起始原料，进行酰氯化，再与脯氨酸缩合

(1-1)在反应容器中加入3-邻苯二甲酰亚胺基丙酸和氯化亚砜，搅拌溶解后，除去氯化亚砜，加入二氯甲烷制得混合溶液；

(1-2)在室温下将步骤(1-1)所得混合溶液滴加到脯氨酸碱水溶液中，调节其pH至8-9，然后常温反应4-6小时；

(1-3)待步骤(1-2)反应结束后，调节pH至1-2，后经萃取、水洗、旋蒸，即得到3-邻苯二甲酰亚胺基丙酰脯氨酸；

(2)侧链邻苯二甲酰保护的L-2,4-二氨基丁酰苄胺盐酸盐的制备：

(2-1)向反应容器中加入Boc-L-2,4-二氨基丁酸、碳酸钠水溶液，冷却至0-5℃；

(2-2)加入N-乙氧甲酰邻苯二甲酰亚胺，室温反应6-8小时；

(2-3)反应结束后，乙醚洗涤水层，然后水层调节其pH至2-3，加入乙酸乙酯萃取3次，合并有机层，有机层用水洗2-3次，然后加入无水硫酸钠干燥后经过滤、浓缩、结晶制得Boc-L-Dab(Pht)-OH，再于50-60℃干燥待用；

(2-4)将步骤(2-3)所得Boc-L-Dab(Pht)-OH加入四氢呋喃以及三乙胺，冷却至-10-0℃，滴加如氯甲酸异丙酯，0-5℃反应1-2小时，然后加入苄胺，0-5℃反应6-8小时，然后加入乙酸乙酯以及水，加入盐酸调节其pH至3-4，分层，有机层用水洗2-3次，然后加入无水硫酸钠干燥后经过滤、浓缩、结晶制得Boc-L-Dab(Pht)-NBzl，再于50-60℃干燥待用；

(2-5)将步骤(2-3)所得Boc-L-Dab(Pht)-NBzl加入乙酸乙酯盐酸溶液，室温搅拌，析出固体，过滤，冰乙酸乙酯洗涤，抽干得侧链邻苯二甲酰保护的L-2,4-二氨基丁酰苄胺盐酸盐；

(3)缩合反应：

将步骤(1-3)所得3-邻苯二甲酰亚胺基丙酰脯氨酸与步骤(2-5)得到侧链邻苯二甲酰保护的L-2,4-二氨基丁酰苄胺盐酸盐通过缩合剂在有机溶剂中进行缩合反应；

(4)脱保护反应：

(4-1)将步骤(3)缩合反应所得产物加入醇类溶剂以及水合肼，加热回流12-36小时；

(4-2)然后经过滤、漂洗、浓缩，得到游离的类蛇毒三肽；

(4-3)将步骤(4-3)游离的类蛇毒三肽加入酸成盐，冷冻干燥或结晶后得到类蛇毒三肽的成盐产品。

3.根据权利要求2所述的类蛇毒三肽的合成方法，其特征在于，步骤(1)所述的3-邻苯二甲酰亚胺基丙酸与脯氨酸的质量比为1:0.6-1.5。

4.根据权利要求2所述的类蛇毒三肽的合成方法，其特征在于，步骤(2-2)所述的N-乙氧甲酰邻苯二甲酰亚胺与Boc-L-2,4-二氨基丁酸的质量比为1-2:1；

步骤(2-4)所述的苄胺与Boc-L-Dab(Pht)-OH的质量比为0.8-3：1。

5.根据权利要求2所述的类蛇毒三肽的合成方法，其特征在于，步骤(3)所述的缩合反应的缩合剂为DCC、DIC、EDCl、HBTU、HATU、TBTU以及COMU中的一种。

6.根据权利要求2所述的类蛇毒三肽的合成方法，其特征在于，步骤(3)所述的有机溶剂为N,N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、四氢呋喃或乙酸乙酯的一种或混合组合。

7.根据权利要求2所述的类蛇毒三肽的合成方法，其特征在于，步骤(3)所述的缩合剂与3-邻苯二甲酰亚胺基丙酰脯氨酸、侧链邻苯二甲酰保护的L-2,4-二氨基丁酰苄胺盐酸盐的质量比为1-3：1：1-0.8。