[发明专利]耐CDK4/6抑制剂的人肺癌细胞系及其建立和应用

权利要求书

1.一种耐药人肺癌细胞系，其特征在于，命名为耐CDK4/6抑制剂的人肺癌细胞株NCI-H1299/Re，保藏编号为CCTCC NO：C2021217。

2.如权利要求1所述的耐药人肺癌细胞系的子代细胞系。

3.如权利要求1所述的耐药人肺癌细胞系或如权利要求2所述的子代细胞系，其特征在于，CD133蛋白过表达。

4.如权利要求1所述的耐药人肺癌细胞系或如权利要求2所述的子代细胞系，其特征在于，所述CDK4/6抑制剂为Ribocicli。

5.如权利要求1所述的耐药人肺癌细胞系或如权利要求2所述的子代细胞系，其特征在于，具有肿瘤干细胞的特性。

6.如权利要求1所述的耐药人肺癌细胞系或如权利要求2所述的子代细胞系，其特征在于，为代谢重编程驱动的耐药细胞。

7.如权利要求1所述的耐药人肺癌细胞系或如权利要求2所述的子代细胞系，其特征在于，与亲本细胞NCI-H1299的差异基因富集在以下信号通路：抗生素生物合成、碳代谢、TCA循环、谷胱甘肽代谢、DNA复制、糖酵解/糖异生、细胞周期、丙酮酸代谢、脂肪酸延长或生物合成氨基酸信号通路。

8.如权利要求1所述的耐药人肺癌细胞系或如权利要求2所述的子代细胞系的建立方法，包括以下步骤：

取对数生长期的NCI-H1299细胞，置于含有初始浓度100nmol/L的Ribocicli的完全培养液中培养，待细胞生长至密度达到80-90％，消化细胞并对细胞进行1∶3传代；

置于含有1μmol/L的Ribocicli的完全培养液中培养，待细胞生长至密度达到80-90％，消化细胞并对细胞进行1∶3传代；置于含有1μmol/L的Ribocicli的完全培养液中培养，待细胞生长至密度达到80-90％，消化细胞并对细胞进行1∶3传代；按照以下浓度递增顺序：1μmol/L→2μmol/L→3μmol/L→4μmol/L→5μmol/L→6μmol/L→7μmol/L→8μmol/L→9μmol/L→10μmol/L→15μmol/L→20μmol/L，逐步提高完全培养液中所含Ribocicli的浓度培养细胞并进行消化传代，每一个药物浓度传代两次，直至Ribocicli浓度增加至终浓度20μmol/L，待细胞在所述终浓度稳定生长后，在所述终浓度下维持培养3-4个月，建立耐CDK4/6抑制剂的人肺癌细胞株NCI-H1299/Re。

9.如权利要求1所述的耐药人肺癌细胞系或如权利要求2所述的子代细胞系在作为非小细胞肺癌耐药的细胞模型中的应用。

10.如权利要求1所述的耐药人肺癌细胞系或如权利要求2所述的子代细胞系在研究非小细胞肺癌对CDK4/6抑制剂的耐药机制、筛选非小细胞肺癌耐药逆转药物、筛选非小细胞肺癌治疗药物以及评估非小细胞肺癌治疗药物的疗效中的应用。