[发明专利]云实皮药物药代动力学和组织分布的动物模型构建方法

说明书

本发明公开了云实皮药物药代动力学和组织分布的动物模型构建方法。采用UPLC‑MS/MS建立云实皮提取物中3‑去氧苏木查尔酮、异甘草素、原苏木素B、原苏木素B‑10‑O‑β‑D‑葡萄糖苷4种成分在大鼠血浆和心、肝、脾、肺、肾、胃、十二指肠组织中的分析方法，开展云实皮提取物在大鼠体内的药代动力学和组织分布研究。药动学参数结果显示，各指标成分的t_1/2z在4.57～13.47h，T_max在0.22～0.51h，C_max在27.60～6418.38μg·L^‑1，AUC_0‑t在112.45～11824.25h·μg·L^‑1，MRT_0‑t在3.89～9.01h，CL_z/F在9.85～96.87L·h^‑1·kg^‑1。组织分布结果显示，在不同时间点上，各指标成分在体内分布较为广泛，具有不均衡的特征，在胃和十二指肠分布较多，其次分布于肝、脾、肺、肾等组织，在心脏中分布最少。

技术领域

本发明属于中药有效成分体内代谢研究技术领域，特别涉及云实皮药物药代动力学和组织分布的动物模型构建方法。

背景技术

云实皮为豆科植物云实Caesalpinia decapetala(Roxb.)Alston的干燥根或根皮，主产贵州，其已被《贵州省中药材、民族药材质量标准》、《苗族医药学》、《中华本草》(苗药卷)收载。目前以云实皮为主药上市的贵州民族药品种有“云实感冒合剂”、“清痹通络药酒”等。文献报道云实皮具有祛风除湿、解毒消肿之功效，民间常将其用于风寒感冒、支气管炎、咳嗽、咽喉肿痛、风湿痹痛等症的治疗。云实具有解热、镇痛、抗炎、抗病毒、抗氧化活性，主要含有黄酮类、萜类、苯丙酸类、甾体类和酚类化学成分。目前，关于云实皮的研究报道主要集中在化合物分离鉴定和药理活性方面，体内过程尚缺乏研究。体内过程是药物发挥药理作用、产生疗效的基础，从中药体内过程研究其药效物质基础及机制存在明显优势。云实皮药物代谢动力学与组织分布的动物模型构建未见报道，从而影响了云实皮药物的进一步的开发应用。

近年来不断发展的液质联用技术作为中药体内过程研究的有力手段，以其快速、便捷、灵敏度高、专属性强等特点较好地解决了中药成分复杂、进入体内含量相对较低、检测干扰大所带来的困扰。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是提供一种云实皮药物药代动力学和组织分布的动物模型构建方法。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

1.云实皮药物药代动力学和组织分布的动物模型构建方法，其特征在于，大鼠灌胃给予云实皮提取物药液后，在不同时间点采集血浆，通过测定标志性成分在大鼠血浆中的含量，得到云实皮药物大鼠体内的药代动力学参数；大鼠灌胃给予云实皮提取物药液后，经股动脉放血后取大鼠组织用于药代动力学分析，通过测定标志性成分在大鼠各组织中的含量，得到云实皮药物大鼠组织分布的药代动力学数据。

作为优选，大鼠血浆的采集时间分别为给药后0.083h、0.167h、0.33h、0.5h、0.75h、1h、1.5h、2h、4h、6h、8h、12h、24h经大鼠尾静脉取血。

作为优选，所述标志性成分为：原苏木素B-10-O-β-D-葡萄糖苷、原苏木素B、3-去氧苏木查尔酮和异甘草素。

作为优选，包括以下步骤：

(1)测试样品的制备

a.云实皮药液配制:取云实皮药材，加入乙醇提取，滤液减压浓缩，饱和正丁醇萃取，真空干燥，即得云实皮提取物；云实皮提取物加入羧甲基纤维素钠溶液，超声溶解并搅拌，即得药液；

b.大鼠血浆样品采集：取健康大鼠，单次给予所述药液，于给药后经尾静脉取血，即得含药大鼠血浆样品；