[发明专利]抗人Lp-PLA2单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了抗Lp‑PLA2单克隆抗体及其应用，所公开的抗Lp‑PLA2单克隆抗体，具有良好的稳定性和特异性，能够作为制备Lp‑PLA2诊断试剂的关键原料，且具有抗脂蛋白和同族蛋白干扰的能力，与脂蛋白结合不会影响检测结果。采用该单克隆抗体可开发出特异性好、准确度高的诊断检测试剂盒，适用于多地检测环境，不存在地域差异。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及抗人Lp-PLA2单克隆抗体及其应用

背景技术

脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)是心血管疾病中一种新的炎症酶，属于磷脂酶家族中PLA2的一种，是丝氨酸依赖的磷脂酶，能水解氧化低密度脂蛋白(LDL)，产生溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine，Lyso-PC)和氧化型游离脂肪酸(oxidized free fattyacids，ox-FA)，促进动脉粥样硬化的形成和发展。Lp-PLA2的浓度能够反映动脉粥样硬化斑块的形成及严重程度，因此临床上用于预警心血管突发事件，评估冠心病、脑卒中的发生及复发风险。与其他炎性因子相比，受危险因素的影响较小，检测具有更高的灵敏度和特异性，目前已被用作预测心血管事件的风险指标，用以对患者心血管疾病进行早期诊断、疗效观察及预后评估。

目前，临床上用于测定Lp-PLA2的方法较多，例如免疫层析、ELISA、免疫比浊和化学发光等，但试剂盒中使用的抗体几乎全部来自进口，成本较高，且来源不稳定，一定程度上限制了Lp-PLA2检测试剂盒的发展。

而国内目前却很难生产出性能优良的抗Lp-PLA2的单克隆抗体，主要原因是，一方面Lp-PLA2在血液中容易与脂蛋白相结合，结合了脂蛋白的Lp-PLA2中的抗原表位被遮挡，使单克隆抗体无法准确的识别血液中的Lp-PLA2，增加了抗体开发的难度；另一方面，能够临床应用的Lp-PLA2单克隆抗体，除了抗体本身之外，还需要考虑其应用的环境对其的影响，保证试剂盒中各组分在任何检测环境下，不会因为抗体原料本身而影响检测的灵敏度、精密度和稳定性等，因此，抗体除了具有高亲和力以外，还需要在各种环境下均能保持稳定的性能。

发明内容

本发明的目的在于提供对人Lp-PLA2有高亲和力的抗体，该抗体能抗脂蛋白和同家族其他蛋白的干扰。

1.抗人Lp-PLA2单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含：

a)如SEQ ID NO:1所列的重链可变区；

b)如SEQ ID NO:2所列的轻链可变区；

上述抗人Lp-PLA2单克隆抗体或其抗原结合部分，命名为LP-A

或

a)如SEQ ID NO:3所列的重链可变区CDR1；

b)如SEQ ID NO:4所列的轻链可变区CDR2；

上述抗人Lp-PLA2单克隆抗体或其抗原结合部分，命名为LP-B。

优选的，所述LP-A编码重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.5，所述LP-A编码轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.6；所述LP-B编码重链可变区的核苷酸序列如SEQ IDNO.7，所述LP-B编码轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.8。

优选的，所述LP-A或LP-B特异性结合人Lp-PLA2蛋白，其识别Lp-PLA2蛋白不受PLA2G3和PLA2G12A蛋白的干扰。

优选的，所述LP-A或LP-B结合位点位于脂蛋白结合区域之外。

本发明的另一方面公开了，一种包含上述LP-A或LP-B的Lp-PLA2的检测试剂盒。

优选的，所述试剂盒采取LP-A和LP-B同时识别Lp-PLA2蛋白，测定Lp-PLA2蛋白浓度。