[发明专利]禽流感病毒三聚体亚单位疫苗及其应用

权利要求书

1.流感病毒抗原，其中：

(1)所述流感病毒抗原从5’端到3’端的方向依次包括：

流感病毒A/California/07/2009 H1N1 HA蛋白三聚体形成区LAH K403-N474，其氨基酸序列为SEQ ID NO：1；

以及流感病毒H7N9 HA1区，所述流感病毒H7N9 HA1区与A/Shanghai/2/2013H7N9 HA1区D18-S340的氨基酸序列同源性大于90％，例如大于90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或等于100％，且存在差异的位点在流感病毒H7N9 HA1区的loop区，所述流感病毒H7N9 HA1区例如选自：

A/Shanghai/2/2013H7N9 HA1区D18-S340，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2，

或A/Anhui/1/2013H7N9 HA1区D18-S340，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3，

或A/Guangdong/17SF003/2016H7N9 HA1区D18-S340，其氨基酸序列为SEQ ID NO：4，

或A/Hong_Kong/125/2017H7N9 HA1区D18-S340，其氨基酸序列为SEQ ID NO：5；或

(2)所述流感病毒抗原从5’端到3’端的方向依次包括：

流感病毒A/California/07/2009H1N1 HA蛋白三聚体形成区LAH K403-N474，其氨基酸序列为SEQ ID NO：1，

以及流感病毒H5N1 HA1区，所述流感病毒H5N1 HA1区与A/Indonesia/5/2005H5N1 HA1区D18-E341的氨基酸序列同源性大于90％，例如大于90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或等于100％，且存在差异的位点在流感病毒H5N1 HA1区的loop区，所述流感病毒H5N1 HA1区例如选自：

A/Indonesia/5/2005H5N1 HA1区D18-E341，其氨基酸序列为SEQ ID NO：6，

或A/Hong Kong/156/97H5N1 HA1区D18-E341，其氨基酸序列为SEQ ID NO：7；

优选地，其中所述流感病毒抗原是三聚体蛋白。

2.如权利要求1所述的流感病毒抗原，其进一步包括在5’端的分泌信号肽(例如氨基酸序列为SEQ ID NO：8的流感病毒A/California/07/2009H1N1 HA蛋白信号肽，氨基酸序列为SEQ ID NO：9的GP67信号肽，或其他流感病毒H7N9 HA1或流感病毒H5N1 HA1的信号肽)以及在3’端的纯化标签(例如，6×His标签)和终止密码子(例如：TAA、TAG或TGA)。

3.如权利要求1或2所述的流感病毒抗原，其包含如(1)或(2)所示氨基酸序列：

(1)如SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：15所示的流感病毒抗原的氨基酸序列；

(2)(1)中的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个氨基酸或更多个氨基酸且不改变(1)的抗原性的由(1)衍生的多肽或其类似物，且自身能够形成三聚体。

4.分离的多核苷酸，其编码权利要求1-3中任一项所述的流感病毒抗原，优选地所述分离的多核苷酸包含如SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：22、SEQ IDNO：23或SEQ ID NO：24所示的序列。

5.重组载体或者表达盒，其包含权利要求4所述的分离的多核苷酸。

6.转基因细胞系或者重组菌，其包含权利要求5所述的重组载体或者表达盒。

7.如权利要求6所述的转基因细胞系，其源自昆虫细胞，例如昆虫细胞Sf9或Hi5。