[发明专利]一种基于多孔凝胶阵列的细胞培养基质及其制备方法在审
| 申请号： | 202111645569.X | 申请日： | 2021-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN114317393A | 公开（公告）日： | 2022-04-12 |
| 发明（设计）人： | 诸葛鑫 | 申请（专利权）人： | 智享生物（苏州）有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/00 | 分类号： | C12N5/00;C08B37/08;C08J9/00;C08L5/08 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 王熙文 |
| 地址： | 215000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 多孔 凝胶 阵列 细胞培养 基质 及其 制备 方法 | ||
1.一种基于多孔凝胶阵列的细胞培养基质的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)配制透明质酸钠溶液，在冰水浴下第一次滴加甲基丙烯酸酐，并加入氢氧化钠溶液调节反应体系的pH至8-9，在3-4℃下反应10-12h，然后第二次滴加甲基丙烯酸酐，加入氢氧化钠溶液调节反应体系的pH至8-9，继续反应20-24h，反应结束后加入过量的冰乙醇，之后离心处理，收集沉淀，将沉淀重新溶于去离子水中，之后冷冻干燥，制得甲基丙烯酸酯化透明质酸钠；
(2)将上述制得的甲基丙烯酸酯化透明质酸钠、重构RGD粘附肽和0.01MOL/L的磷酸盐缓冲液混合搅拌处理，然后加入二硫苏糖醇混合均匀，制得凝胶原液；以装有微柱的聚二甲基硅氧烷为模板，对凝胶原液进行浇注成型，固化后，脱模处理，制得基于多孔凝胶阵列的细胞培养基质。
2.根据权利要求1所述的一种基于多孔凝胶阵列的细胞培养基质的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述透明质酸钠溶液的质量浓度为0.8-1.5wt％。
3.根据权利要求1所述的一种基于多孔凝胶阵列的细胞培养基质的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述氢氧化钠溶液的浓度为10mol/L。
4.根据权利要求1所述的一种基于多孔凝胶阵列的细胞培养基质的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，第一次滴加的甲基丙烯酸酐与透明质酸钠的摩尔比为1:10-11。
5.根据权利要求1所述的一种基于多孔凝胶阵列的细胞培养基质的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，第二次滴加的甲基丙烯酸酐与透明质酸钠的摩尔比为1:2-3。
6.根据权利要求1所述的一种基于多孔凝胶阵列的细胞培养基质的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述凝胶原液中甲基丙烯酸酯化的透明质酸钠的浓度为5-6wt％，重构BGD粘附肽的浓度为0.3-0.5mmol/L，二硫苏糖醇的质量浓度为5-6wt％。
7.根据权利要求1所述的一种基于多孔凝胶阵列的细胞培养基质的制备方法，其特征在于：所述模板上微柱的直径为400μm，高度为200μm，所述微柱的列数和行数均至少为6。
8.根据权利要求1所述的一种基于多孔凝胶阵列的细胞培养基质的制备方法，其特征在于：所述固化是采用400-410nm的紫外光照射处理30-90s。
9.一种基于多孔凝胶阵列的细胞培养基质，其特征在于：由权利要求1至8任一所述的方法制备而成。
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