[发明专利]一种兽用重组绒促性素的纯化方法在审
| 申请号： | 202111643172.7 | 申请日： | 2021-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN114349844A | 公开（公告）日： | 2022-04-15 |
| 发明（设计）人： | 罗昊澍;于金库;裴慧玲;师磊;韩国;熊剑胜 | 申请（专利权）人： | 北京伟杰信生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/59 | 分类号： | C07K14/59;C07K1/16;C07K1/18;C07K1/20 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 孙怡 |
| 地址： | 100085 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 绒促性素 纯化 方法 | ||
1.一种重组hCG的纯化方法，其特征在于，所述的纯化方法中，使rhCG经受以下步骤：(1)复合层析；(2)阳离子交换层析；(3)疏水层析。
2.根据权利要求1所述的重组hCG的纯化方法，其特征在于，步骤(1)中，复合层析介质偶联一种复合型阳离子配基MMC。
3.根据权利要求2所述的重组hCG的纯化方法，其特征在于，步骤(1)中，所用洗脱液含有0.3～0.4M精氨酸。
4.根据权利要求3所述的重组hCG的纯化方法，其特征在于，步骤(1)所述的复合层析用10～100mM的NaAC/HAC缓冲液作为洗脱液，其pH值为5.5。
5.根据权利要求4所述的重组hCG的纯化方法，其特征在于，步骤(2)所述的阳离子交换层析采用单分散聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物基球。
6.根据权利要求5所述的重组hCG的纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，洗脱液为5～20mM Tris-HCl，pH5.5。
7.根据权利要求6所述的重组hCG的纯化方法，其特征在于，步骤(3)所述的疏水交换层析介质基质偶联苯基作为疏水交换基团；步骤(3)中所用缓冲液为Tris-HCl缓冲液，pH值在6.0～10。
8.根据权利要求7所述的重组hCG的纯化方法，其特征在于，步骤(3)所述的疏水交换层析采用蛋白流穿模式。
9.根据权利要求1～8任一项所述的重组hCG的纯化方法，其特征在于，重组hCG经受以下步骤：
(0)深层过滤；
(1)在MMC复合层析介质上用10～100mM的NaAC/HAC，0.3～0.4M的NaCl，0.3～0.4M精氨酸，pH值为5.5的缓冲液作为洗脱液，进行洗脱；
(2)将步骤(1)的洗出液在以单分散聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物基球为支撑的填料介质上进行阳离子交换层析，以5～20mM Tris-HC缓冲液，0.4～0.6M的NaCl，pH值5～5.5作为洗脱液；
(3)采用目的蛋白流穿模式，将步骤(2)的洗出液在偶联苯基的疏水层析介质上进行纯化。
10.一种纯化的rhCG，其特征在于，所述纯化的rhCG通过权利要求1～9任一所述的纯化方法纯化后得到。
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