[发明专利]一种病灶微环境免疫细胞功能调控递送系统及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种病灶微环境免疫细胞功能调控递送系统及其制备方法和应用，包括外壳和内核，所述外壳为在接触胎盘组织间液高表达的酶的作用下靶向崩解的酶底物多肽‑PEG修饰的脂质双分子膜，所述内核为胎盘内免疫细胞表面特异性高表达的标志物抗体修饰的药物载体，所述药物载体中负载超顺磁性四氧化三铁SPIO纳米粒子、调控胎盘内免疫细胞功能的小分子药物、治疗基因或其组合。本发明的递送系统可有效避免调控胎盘内免疫细胞时，对全身其他部位的同种免疫细胞功能产生影响；也可有效避免在胎盘内给药时，母体和胎儿非特异性药物吸收，进而实现对胎盘内巨噬细胞特异性药物的递送和功能调控。

技术领域

本发明涉及生物医学工程领域，具体涉及一种病灶微环境免疫细胞功能调控递送系统及其制备方法及其应用。

背景技术

妊娠期高血压(子痫前期，preeclampsia，PE)是一种围产期常见重大疾病，指妊娠20周以后，出现血压升高和蛋白尿，严重者发展为抽搐发作或昏迷，严重危及孕妇和胎儿安全，是孕产妇第2大死因)。目前，除终止妊娠外，对PE无有效的药物和其他治疗方法。胎盘的发育中，母胎之间的免疫耐受和母体对抗病原的免疫激活平衡至关重要，直接影响和调控胎盘的发育。胎盘的免疫功能与众多胎盘功能疾病密切相关，巨噬细胞(macrophage)是胎盘内含量最高的免疫细胞【Annu Rev Immunol.2013；31:387-411.】。研究发现，PE发生发展过程中，胎盘的血管生成等功能严重不足，其根源在于胎盘促血管生成等功能受损【Int JMol Sci.2021Sep 7；22(18):9675】。目前研究发现，胎盘中巨噬细胞的功能和表型与胎盘血管发育，以及子痫前期等疾病的发生密切相关【Int J Mol Sci.2019Jul 28；20(15):3695；Innate Immun.2019；11(6):447-456.】。巨噬细胞在胎盘中可能出现的表型分为M1型和M2型，如果M2型巨噬细胞比例降低，将会导致胎盘血管生成不足；而M2型巨噬细胞增加，可以促进胎盘血管生成，改善子痫症状【Arch Immunol Ther Exp(Warsz).2019Oct；67(5):295-309.】。

如何实现胎盘内巨噬细胞M1表型向M2表型的转变？我们在前期研究中发现，如果能够抑制M1型巨噬细胞NF-κB通路活性，可以起到向M2表型转化的作用。同时，如果能促进巨噬细胞PPARγ活性，也可以促进向M2表型转化【Eur J Pharmacol.2020Jun15；877:173090.】。联合应用这两种调控手段，将会起到协同促进M1型巨噬细胞向M2表型转化的效果【Annu Rev Physiol.2010；72:219-46.】。我们在前期已经证实单独或联合应用NF-κB抑制剂(如RelA的siRNA)和PPARγ激活剂(如Rosiglitazone)，可以实现有效的M1向M2细胞增加效果，并且证明这种转化可以促进胎盘的血管生成。所以，如果能够实现体内联合应用Rosiglitazone和RelA-siRNA，促进胎盘内确切的M2巨噬细胞激活和促血管生成效果，促进胎盘正常发育，就有望有效改善子痫前期的孕妇反应性高血压症状。

如何在调控胎盘内巨噬细胞的同时，避免对胎盘外巨噬细胞的调控？巨噬细胞在全身各组织器官普遍存在。现有可能具有免疫功能调控作用的药物，均不可避免地在母体各器官分布，产生大量的免疫并发症；并通过胎盘，向胎儿分布。这些药物在免疫功能调控的同时，会产生对母体和胎儿的毒性。目前包括急救药品在内的孕妇用药均存在极多的禁忌，孕妇的药物使用和新药开发中首先面临的问题是，需要考虑对药物在母体和胎儿的分布和毒性问题。绝大多数的药物可以通过胎盘，分布进入胎儿侧，影响胎儿发育。因此，可在体外实验中实现巨噬细胞、促血管生成等功能调控的药物，无法真正在保证用药安全的前提下，实现胎盘内巨噬细胞功能调控。因此，如何避免对母体和胎儿的毒性，实现巨噬细胞功能调控药物对胎盘中巨噬细胞的精准递送，是解决巨噬细胞功能失调所致子痫前期等疾病症状的关键。

目前研究者尝试过的可能促进胎盘内细胞特异性纳米药物递送的手段有2种，一种是通过加大纳米药物粒径，使其不能通过胎膜屏障，滞留于胎盘产生药物递送效果；另一种是针对细胞细胞膜标志物，进行抗体修饰纳米载体的特异性递送。