[发明专利]一种轮状病毒攻毒动物模型及其建立方法

说明书

本发明涉及一种轮状病毒攻毒动物模型及其建立方法，属于生物技术领域。本发明提供了一种轮状病毒攻毒动物模型，所述轮状病毒攻毒动物模型为灌胃有抗酸保护剂（如己二酸二钠、碳酸氢钠、琥珀酸钠、枸橼酸钠、苹果酸钠以及乙酸钠等）和轮状病毒的乳鼠；研究发现，在使用轮状病毒进行攻毒前，或者，在使用轮状病毒进行攻毒时，给大日龄乳鼠灌胃抗酸保护剂，可有效提高大日龄乳鼠的轮状病毒发病率以及模型稳定性，而大日龄乳鼠可完成疫苗的完整免疫流程，因此，除轮状病毒毒株毒力评价外，所述轮状病毒攻毒动物模型在轮状病毒疫苗有效性的评价中也极具应用前景。

技术领域

本发明涉及一种轮状病毒攻毒动物模型及其建立方法，属于生物技术领域。

背景技术

轮状病毒（Rotavirus，RV）是一种双链核糖核酸病毒，属于呼肠孤病毒科，是引起五岁以下婴幼儿腹泻的主要病原体之一，全球每年感染人数上亿，造成死亡人数数十万。在我国，每年大约有1000万婴幼儿患轮状病毒感染性胃肠炎，占婴幼儿人数的1/4，是引起婴幼儿严重腹泻的最主要病原。轮状病毒在1973年首次被发现，但至今仍无特效药，并且，现有的轮状病毒疫苗在不同地区的保护效果差异巨大且存在安全问题，因此，轮状病毒致病机制的研究和安全、高效疫苗的开发成为了当务之急，而有效的动物模型是致病机制研究和疫苗开发的重要环节和工具。

目前，轮状病毒动物模型的研究主要集中在乳鼠动物模型。在日龄选择上均以7日龄乳鼠为研究对象（具体可见文献“陈军华. 轮状病毒感染动物模型建立及其发病机制研究 [D]; 重庆医科大学, 2007.”、“林海军. 轮状病毒乳鼠动物模型的建立与初步应用[D]; 厦门大学.”和“乔洪图. 轮状病毒动物模型的构建及ZTR--68株灭活轮状病毒疫苗的体内保护性实验 [D]; 北京协和医学院(清华大学医学部)中国医学科学院.”）。但是，由于疫苗免疫至少经过一针、两针或以上的免疫流程，而7日龄乳鼠日龄太小无法完成免疫流程，使得7日龄乳鼠的动物模型无法用来评估轮状疫苗的免疫效果，因此，需要大日龄乳鼠的攻毒模型来评估疫苗的免疫效果。

然而，乳鼠日龄对轮状病毒的发病率有明显的影响，日龄越大的乳鼠轮状病毒发病率越低，这严重阻碍了轮状病毒大日龄乳鼠攻毒模型的构建，因此，亟需找到提高大日龄乳鼠轮状病毒发病率以及模型稳定性的方法，以用于评估轮状病毒疫苗的有效性。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种轮状病毒攻毒动物模型，所述轮状病毒攻毒动物模型为灌胃有抗酸保护剂和轮状病毒的动物。

在本发明的一种实施方式中，所述动物为乳鼠。

在本发明的一种实施方式中，所述乳鼠为昆明小鼠乳鼠、BALB/c小鼠乳鼠、Swiss小鼠乳鼠或ICR小鼠乳鼠中的一种或一种以上。

在本发明的一种实施方式中，所述乳鼠为3~16日龄的乳鼠。

在本发明的一种实施方式中，所述乳鼠为7~16日龄的乳鼠。

在本发明的一种实施方式中，所述抗酸保护剂为己二酸二钠、碳酸氢钠、琥珀酸钠、枸橼酸钠、苹果酸钠或乙酸钠中的一种或一种以上。

在本发明的一种实施方式中，所述灌胃为先灌胃抗酸保护剂，再灌胃轮状病毒；或者，所述灌胃为灌胃抗酸保护剂和轮状病毒的混合物。

在本发明的一种实施方式中，所述灌胃为先以50~500μL/只的剂量灌胃浓度为0.1~2M的抗酸保护剂溶液，1~30min后，再以3.0~10.0 lgCCID₅₀/只的剂量灌胃轮状病毒。

在本发明的一种实施方式中，所述灌胃为先以50~200μL/只的剂量灌胃浓度为0.3~1.5M的抗酸保护剂溶液，5~20min后，再以3.0~10.0 lgCCID₅₀/只的剂量灌胃轮状病毒。