[发明专利]一种猪圆环病毒3型纯品蛋白的定量检测方法在审
申请号: | 202111635695.7 | 申请日: | 2021-12-28 |
公开(公告)号: | CN114354526A | 公开(公告)日: | 2022-04-15 |
发明(设计)人: | 徐松;薛霜;徐芳;石瑛;郑成;刘项羽;兖秦芳;胡玉立;漆世华;石宝兰;谢红玲 | 申请(专利权)人: | 国药集团动物保健股份有限公司 |
主分类号: | G01N21/33 | 分类号: | G01N21/33;G01N1/34;G01N1/40 |
代理公司: | 深圳市世纪恒程知识产权代理事务所 44287 | 代理人: | 许青华 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 圆环 病毒 纯品 蛋白 定量 检测 方法 | ||
1.一种猪圆环病毒3型纯品蛋白的定量检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
S10、将蛋白标准品配制成多个蛋白含量不同的标准液,测试每个所述标准液在280nm处的紫外吸收连续数值,并计算所述连续数值的曲线所形成的峰图面积,然后根据蛋白标准品的含量与所述峰图面积的关系绘制标准曲线;
S20、获得待测PCV3 Cap纯品蛋白样品的峰图面积,然后根据所述标准曲线,确定所述待测PCV3 Cap纯品蛋白样品中的PCV3 Cap蛋白总含量。
2.如权利要求1所述的猪圆环病毒3型纯品蛋白的定量检测方法,其特征在于,所述蛋白标准品为PCV3 Cap蛋白。
3.如权利要求2所述的猪圆环病毒3型纯品蛋白的定量检测方法,其特征在于,在步骤S10之前还包括以下步骤:
S1、将PCV3 Cap纯品蛋白溶液的pH值调节至所述PCV3 Cap纯品蛋白溶液中的PCV3 Cap蛋白的等电点,然后将所述PCV3 Cap纯品蛋白溶液离心,得到PCV3 Cap蛋白沉淀;
S2、将所述PCV3 Cap蛋白沉淀干燥,并称重;
S3、根据所述PCV3 Cap蛋白沉淀的干重计算出所述PCV3 Cap纯品蛋白溶液的浓度,然后将已知浓度的所述PCV3 Cap纯品蛋白溶液作为PCV3 Cap蛋白标准品。
4.如权利要求1所述的猪圆环病毒3型纯品蛋白的定量检测方法,其特征在于,所述待测PCV3 Cap纯品蛋白样品是由重组工程菌表达系统、杆状病毒/昆虫细胞表达系统或哺乳动物细胞表达系统表达、然后纯化得到的。
5.如权利要求1所述的猪圆环病毒3型纯品蛋白的定量检测方法,其特征在于,检测所述紫外吸收连续数值的仪器包括蛋白纯化仪。
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