[发明专利]一种多肽组合及其在新型冠状病毒抗体检测中的应用

说明书

本发明公开了一种多肽组合及其在新型冠状病毒抗体检测中的应用。所述多肽组合是由氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的多肽，与氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的多肽和/或氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的多肽组成。本发明还提供了所述多肽组合在制备新型冠状病毒抗体检测产品中的应用。本发明的多肽组合能有效捕捉SARS‑CoV‑2抗体，能降低因全长S蛋白、受体结合区(RBD)或S蛋白亚基的非特异性反应所致的假阳性率，提高SARS‑CoV‑2抗体检测的灵敏度和特异性。

技术领域

本发明属于病毒抗体检测技术领域。具体地，涉及一种多肽组合及其在新型冠状病毒抗体检测中的应用。更具体地，涉及新型冠状病毒SARS-CoV-2S蛋白抗原优势表位多肽组合及其在SARS-CoV-2抗体检测中的应用。

背景技术

新型冠状病毒(novel Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)首次发现于2019年，感染人类后可引起发热、干咳、乏力等非特异性症状，重症患者可进展为急性呼吸窘迫综合征、多器官功能衰竭，甚至死亡。截至2021年10月5日，WHO共报告了超过2.35亿例确诊及480万例死亡病例。

SARS-CoV-2属于β-冠状病毒，其基因组编码四种结构蛋白(刺突蛋白S、包膜蛋白E、膜蛋白M和核衣壳蛋白N)和十六种非结构蛋白(Nsp1-16)。S蛋白分为S1和S2两个亚基。S1的受体结合域(RBD)负责与宿主细胞表面受体ACE2结合，S2则介导病毒与宿主细胞膜融合。此外，RBD包含许多抗体识别优势抗原表位。

SARS-CoV-2检测的金标准是病毒培养，因耗时长、敏感性低、且要求在生物安全3级实验室进行，无法用于大规模筛查。目前临床上检测SARS-CoV-2的方法主要是PCR法，但该法容易发生交叉污染，对技术人员要求高，且受样本质量的影响。而血清学检测操作简单，可作为PCR法的补充手段和流行病学调查。

现有新冠抗体检测试剂盒的靶抗原分别有全长的S蛋白、受体结合区(RBD)或S蛋白亚基等抗原。SARA-CoV-2S蛋白与其他6种类型人致病性冠状病毒的S蛋白序列相似性分别为77.38％(SARS-CoV)、32.79％(MERS-CoV)、28.28％(HCoV-NL63)、30.35％(HCoV-229E)、32.81％(HCoV-OC43)、31.86％(HCoV-HKU1)。利用全长的S蛋白、RBD或S蛋白亚基作为靶抗原可能与既往感染其他类型人致病性冠状病毒存在交叉反应，出现假阳性，影响试剂盒特异性。因此，筛选出SARS-CoV-2S蛋白上高灵敏度和特异性的优势抗原表位并验证，对后续高灵敏度和特异性抗体检测试剂盒的制备具有现实意义。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种SARS-CoV-2S蛋白抗原优势表位多肽组合，能有效捕捉SARS-CoV-2抗体，能降低因全长S蛋白、RBD或S蛋白亚基的非特异性反应所致的假阳性率，提高SARS-CoV-2抗体检测的灵敏度和特异性。

本发明的另一个目的在于提供一种上述多肽组合在制备新型冠状病毒抗体检测产品中的应用。包括检测试剂、检测试剂盒等等。

为达到上述目的，本发明采用下述技术方案：

第一方面，本发明提供了新型冠状病毒S蛋白抗原表位多肽组合，是由氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的多肽，与氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的多肽和/或氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的多肽组成。

本发明针对SARS-CoV-2抗体检测中可能受其他亚型的冠状病毒影响从而造成检测结果的假阳性问题，通过免疫表位数据库(IEDB)筛选了一系列SARS-CoV-2S蛋白抗原优势表位多肽，并进行了最佳组合的筛选，以期提高SARS-CoV-2抗体检测的灵敏度和特异性。