[发明专利]一种一步快速解离蛋白质-小分子复合物的方法

说明书

本发明涉及一种解离蛋白质‑小分子复合物的方法，包括：将吸附材料填充在两端开放的管体中，得到填充柱；以及将待解离的蛋白质‑小分子复合物样品溶液通过所述填充柱进行解离，使得所述小分子被吸附至所述填充柱，而所述蛋白质留在流出液中且蛋白质仍然具有活性；其中，所述吸附材料为：未经处理的碳纤维、经表面修饰的碳纤维、高分子膜、金属‑有机骨架材料或共价‑有机骨架材料。本发明方法可实现蛋白质‑小分子复合物的一步解离，步骤简单，快速高效，克服了传统方法多次、长时间离心以及大量使用有机溶剂的缺陷。

技术领域

本发明涉及蛋白质-小分子复合物解离分析技术领域，具体涉及一种一步快速解离蛋白质-小分子复合物的方法。

背景技术

小分子和蛋白质之间的结合在细胞调节过程中起着重要的作用。研究蛋白质与小分子之间的解离过程，能够提供新的生物学和药学观点。传统的蛋白质-小分子复合物的解离方法包括：利用有机溶剂使蛋白质变性，破坏蛋白质原有的三维立体结构，从而使蛋白质失去与小分子的相互作用力，进而导致蛋白质与小分子解离。然而，该方法需要使用量大有机溶剂，且还需要离心和吹氮浓缩步骤。此外，该方法还存在蛋白质-小分子复合物使用量高、操作步骤繁琐、小分子检测灵敏度低、成分信息易丢失的缺点。

因此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术中存在的至少一个技术问题，提供一种解离蛋白质-小分子复合物的方法，该方法可实现蛋白质-小分子复合物的一步解离，步骤简单，快速高效，克服了传统方法多次、长时间离心以及大量使用有机溶剂的缺陷，并且解离后的蛋白质不会发生变性，仍然具有生理活性。

为了实现以上目的，本发明提供如下技术方案。

一种解离蛋白质-小分子复合物的方法，包括：

将吸附材料填充在两端开放的管体中，得到填充柱；以及

将待解离的蛋白质-小分子复合物样品溶液通过所述填充柱进行解离，使得所述小分子被吸附至所述填充柱，而所述蛋白质留在流出液中；

其中，所述吸附材料为：未经处理的碳纤维、经表面修饰的碳纤维、高分子膜、金属-有机骨架材料或共价-有机骨架材料。

优选地，经表面修饰的碳纤维可为：表面修饰有其他材料的碳纤维，例如，碳纳米纤维/碳纤维复合物、碳纳米管/碳纤维复合物、高分子膜/碳纤维复合物、金属-有机骨架材料/碳纤维复合物或共价-有机骨架材料/碳纤维复合物；或者，表面修饰有官能团的碳纤维，例如，表面修饰有-OH、-NO₂、-SH、-Ph、-COOH或-NH₂的碳纤维。表面修饰有官能团的碳纤维可通过文献中记载的制备方法得到。例如，表面修饰有-COOH的碳纤维可通过将碳纤维在二氧化碳气氛中进行高温活化而得到。

优选地，所述碳纤维可为聚丙烯腈基碳纤维、沥青基碳纤维或黏胶基碳纤维。

对于表面修饰有官能团的碳纤维，所修饰的官能团如-COOH或-NH₂可以改变碳纤维表面的性质，从而调控碳纤维对不同小分子的吸附能力，以期获得较高的解离率。碳纤维的表面性质可以根据实际需求，即根据小分子本身的性质进行改变。

优选地，所述未经处理的碳纤维和经表面修饰的碳纤维为线型材料，优选为长线型材料。线性材料与其他片状或颗粒状材料相比，可避免蛋白质在流经管体过程中拥堵在材料内部，导致蛋白质残留在管体内。还具有压力小、材料结构有序的优点。长度可根据具体需要进行选择。在一些具体实施方案中，将所述碳纤维贯穿所述两端开放的管体，再去除(例如用剪刀去除)溢出管体部分，即可完成填充。

本发明对于高分子膜、金属-有机骨架材料或共价-有机骨架材料没有特别限制。凡是对所述小分子具有吸附作用且对所述蛋白质没有吸附作用的高分子膜、金属-有机骨架材料或共价-有机骨架材料均适用于本发明。