[发明专利]橄榄链霉菌及其在生物合成香兰素中的应用

权利要求书

1.橄榄链霉菌，其特征在于：所述橄榄链霉菌的菌株拉丁名为Streptomyces olivaceus，于2021年08月16日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.23152。

2.权利要求1所述的橄榄链霉菌在生物合成香兰素中的应用。

3.一种香兰素的生产方法，其特征在于：利用橄榄链霉菌作为转化菌株，阿魏酸为转化底物，进行生物转化，得到香兰素，其中，所述橄榄链霉菌为权利要求1所述的橄榄链霉菌。

4.根据权利要求3所述的香兰素的生产方法，其特征在于：阿魏酸的纯度为50～98%。

5.根据权利要求4所述的香兰素的生产方法，其特征在于：阿魏酸的纯度为60～85%。

6.根据权利要求3所述的香兰素的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）菌体的培养：将橄榄链霉菌的菌种接种于培养基中培养，得到菌液；

2）阿魏酸的转化：将菌液与灭菌后的阿魏酸溶液混合，继续培养，得到含香兰素的发酵液；

3）产物收获：收获含香兰素的发酵液，去除菌体，将上清液进行分离纯化，获得香兰素。

7.根据权利要求6所述的香兰素的生产方法，其特征在于：步骤1）中，所述培养的具体方法为：先将菌种接种于斜面培养基，20～35℃培养2～3天，挑取表面菌丝体，接种于液体种子培养基，20～35℃培养2～3天获得种子液，再转接发酵培养基，20～35℃培养2～3天，得到菌液；步骤2）中，菌液与灭菌后的阿魏酸溶液混合后，阿魏酸的有效浓度为1～50g/L；继续培养的培养时间为3～4天。

8.根据权利要求6所述的香兰素的生产方法，其特征在于：步骤3）中，分离纯化的具体方法为：将上清液的pH值调节至弱碱性，采用大孔吸附树脂柱进行吸附，用纯水顶洗，再用洗脱液进行洗脱，收集洗脱液，将pH调至酸性，浓缩，添加活性炭吸附色素和杂质，过滤后再次浓缩，结晶，得到香兰素。

9.一种阿魏酸生产香兰素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、代谢产物的培养：将权利要求1所述的橄榄链霉菌的菌种接种于培养基中培养，收获发酵液，去除菌体，获得上清液；

b、阿魏酸的转化：向上清液中加入阿魏酸，配制成1～20g/L的溶液，继续转化4～5天，获得含香兰素的转化液；c、产物收获：将含香兰素的转化液的pH值调节至弱碱性，采用大孔吸附树脂柱进行吸附，用纯水顶洗，再用洗脱液进行洗脱，收集洗脱液，将pH调至酸性，浓缩，添加活性炭吸附色素和杂质，过滤后再次浓缩，结晶，得到香兰素。

10.根据权利要求9所述的阿魏酸生产香兰素的方法，其特征在于：步骤b中，加入阿魏酸后，还加入大孔吸附树脂。