[发明专利]一种鉴定改性后的雾霾颗粒物毒性及对肺部纤维化影响的方法

权利要求书

1.一种鉴定改性后的雾霾颗粒物毒性及对肺部纤维化影响的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：获取PM_2.5颗粒；

步骤二：将步骤一的PM_2.5颗粒分别进行金属元素、PAHs和ROS的定量分析；

步骤三：对PM_2.5颗粒中的金属、PAHs或ROS进行去除，分别得到_MetalPM_2.5、_PAHPM_2.5或_ROSPM_2.5；

步骤四：用_MetalPM_2.5、_PAHPM_2.5或_ROSPM_2.5处理不同分化的THP-1细胞，采用Elisa法检测IL-1β的释放，鉴定炎性体的激活状态；

步骤五：通过口咽法使得小鼠吸入_MetalPM_2.5、_PAHPM_2.5或_ROSPM_2.5，并进行Massion染色，鉴定改性后的雾霾颗粒物对肺部纤维化的影响。

2.根据权利要求1所述的一种鉴定改性后的雾霾颗粒物毒性及对肺部纤维化影响的方法，其特征在于，所述的步骤三中PM_2.5颗粒中金属组分的去除，具体为：

采用Chelex 100树脂固相萃取柱吸附PM_2.5中的重金属，Chelex 100树脂经过超纯水预处理后，在聚丙烯SPE储层中加入Chelex 100树脂，制备Chelex 100色谱柱，然后，将PM_2.5水悬浮液通过色谱柱，收集通过的溶液，冷冻干燥保存，该样品被命名为_MetalPM_2.5。

3.根据权利要求2所述的一种鉴定改性后的雾霾颗粒物毒性及对肺部纤维化影响的方法，其特征在于，所述的聚丙烯SPE储层的体积mL：Chelex 100树脂的质量g：PM_2.5水悬浮液的体积mL为3:0.2：1。

4.根据权利要求1所述的一种鉴定改性后的雾霾颗粒物毒性及对肺部纤维化影响的方法，其特征在于，所述的步骤三中PM_2.5颗粒中PAHs的去除，具体为：

将PM_2.5悬浮液与有机溶剂混合物混合提取有机物，所得混合物经离心，将沉淀物冻干保存，该样品命名为_PAHPM_2.5，所述的有机溶剂混合物为正己烷、二氯甲烷和甲醇的混合。

5.根据权利要求2或4所述的一种鉴定改性后的雾霾颗粒物毒性及对肺部纤维化影响的方法，其特征在于，所述的PM_2.5水悬浮液的浓度为5mg mL^-1。

6.根据权利要求4所述的一种鉴定改性后的雾霾颗粒物毒性及对肺部纤维化影响的方法，其特征在于，所述的正己烷、二氯甲烷和甲醇体积比为1:1:1。

7.根据权利要求1所述的一种鉴定改性后的雾霾颗粒物毒性及对肺部纤维化影响的方法，其特征在于，所述的步骤三中PM_2.5颗粒中ROS的去除，具体为：

将PM_2.5水悬浮液与抗坏血酸混合，所得混合物经离心，以去除多余的AA，将沉淀冻干，保存，该样本被命名为_ROSPM_2.5。

8.根据权利要求7所述的一种鉴定改性后的雾霾颗粒物毒性及对肺部纤维化影响的方法，其特征在于，所述的PM_2.5水悬浮液的浓度为1mg mL^-1，抗坏血酸的浓度为250μg mL^-1。