[发明专利]一株可产乳糖酶的哈维氏弧菌变种及其应用

说明书

本发明提供了一株可产乳糖酶的哈维氏弧菌变种，菌株编号为BHNC004002，所述菌株于2021年10月11日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC No：M20211247。本发明还提供了一株哈维氏弧菌变种在表达乳糖酶中的应用，其表达的乳糖酶酶活温度和酶活PH值适应范围广。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体而言，涉及一株可产乳糖酶的哈维氏弧菌变种及其应用。

背景技术

乳糖酶(lactase)，学名β-半乳糖苷半乳糖水解酶，又名β-半乳糖苷酶，是一种白色粉末，无味道，无嗅。乳糖酶通过特定条件催化β—半乳糖苷化合物中β-半乳糖苷键发生水解，将人体内过多的乳糖水解成葡萄糖和半乳糖，易被肠道吸收。目前乳糖酶根据不同来源可分为胞内酶或胞外酶，如乳酸酵母、黑曲霉、米曲霉、米根酶等产乳糖酶均为胞外酶，脆壁克鲁维酵母和大部分细菌产胞内酶。乳酸克拉维酵母菌乳糖酶的最适PH6.0-7.0；最适温度40-45℃，此酶适合于牛乳和甜乳清的加工处理。由黑曲霉制备的乳糖酶最适PH3.5-4.0，最适温度60-65℃，适于加工处理干酪和酸性乳清。由米曲霉生产的乳糖酶最适温度为50-55℃，在PH值为3.5-6.0范围内可应用，适于加工处理牛乳和酸乳，该酶在70℃时热处理很快失活。

哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)，是一种革兰氏阴性菌，呈杆状或短杆状，发光的海洋细菌，广泛分布于海洋环境中。哈维氏弧菌作为发光细菌和水产养殖生物的条件性致病菌，哈维氏弧菌在近十多年得到了广泛的研究。哈维氏弧菌在无盐培养基中不生长，在含盐营养琼脂平板上生长良好。其中在TCBS平板上生长，菌落呈黄色圆形，且不透明；在普通琼脂培养基上为灰白色圆形。现有技术中公开有哈维氏弧菌能表达分泌金属蛋白酶、几丁质酶和磷脂酶等，较少存在有关哈维氏弧菌能够表达乳糖酶研究的报导。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一是提供一株可产乳糖酶的哈维氏弧菌变种(Vibrioharveyi)，菌株编号为BHNC004002，所述菌株于2021年10月11日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址为武汉，保藏编号为CCTCC No：M20211247。

可选地，所述哈维氏弧菌变种的16S rDNA序列为SEQ ID NO.1。

可选地，所述哈维氏弧菌变种是从海南博鳌港海域(E110.60848，N19.186684)的海水中分离得到的。

本发明要解决的技术问题之二是提供一株哈维氏弧菌变种在表达乳糖酶中的应用。

可选地，所述哈维氏弧菌变种表达的乳糖酶酶活温度范围为20-70℃。

可选地，所述哈维氏弧菌变种表达的乳糖酶酶活温度范围为30-50℃。

可选地，所述哈维氏弧菌变种表达的乳糖酶酶活温度为20℃、30℃、40℃、50℃、60℃或70℃。

可选地，所述哈维氏弧菌变种表达的乳糖酶酶活PH值作用范围为3.0-7.7。

可选地，所述哈维氏弧菌变种表达的乳糖酶酶活PH值作用范围为5.0-7.5。

可选地，所述哈维氏弧菌变种表达的乳糖酶酶活PH值为3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0或7.7。

与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：

1、本发明分离和鉴定了一株可产乳糖酶的哈维氏弧菌变种(Vibrio harveyi)，更具体的为本发明鉴定了一株可产乳糖酶的哈维氏弧菌海南变种。通过基因组序列分析和构建系统发育树，确定该菌株为哈维氏弧菌，菌株编号为BHNC004002。